单增李斯特菌血清/培养基菌种保藏方法_技术文章

此法是在无菌条件下，将灭过菌并已蒸发掉水分的液体石蜡倒入培养成熟的菌种斜面（或半固体穿刺培养物）上，石蜡油层高出斜面顶端lcm，使培养物与空气隔绝，加胶塞并用固体石蜡封口后，垂直放在室温或4℃冰箱内保藏。由于液体石蜡阻隔了空气，使菌体处于缺氧状态下，而且又防止了水分挥发，使培养物不会干裂，因而能使保藏期达～2年，或更长。但此法不适合厌氧性细菌。

3.砂土管保藏法

适用于产孢子的放线菌、霉菌及形成芽孢的细菌，对于一些对干燥敏感的细菌如奈氏球菌、弧菌和假单胞杆菌及酵母则不适用。砂土管法兼具低温、干燥、隔氧和无营养物等诸条件，故保藏期较长、效果较好，且微生物移接方便，经济简便。它比石蜡油封藏法的保藏期长，约～0年。

4.麸皮保藏法

此法以麸皮作为载体，吸附接入的孢子，然后在低温干燥条件下保存。适用于产孢子的霉菌和某些放线菌，保藏期在年以上。因操作简单，经济实惠，工厂较多采用。

5.冷冻真空干燥保藏法

简称冻干法，通常采用保护剂制备拟保藏菌种的细胞悬液或孢子悬液于安瓿管中，再在低温下快速将含菌样冻结，并减压抽真空，使水升华将样品脱水干燥，形成*干燥的固体菌块。并在真空条件下立即融封，造成无氧真空环境，置于低温下，使微生物处于休眠状态，而得以保藏。常用的保护剂有脱脂牛奶、血清、淀粉、葡聚糖等高分子物质。

6.液氮超低温保藏法

以甘油、二甲基亚砜等作为保护剂，在液氮超低温（-96℃）下保藏。其主要原理是菌种细胞从常温过渡到低温，并在降到低温之，使细胞内的自由水通过细胞膜外渗出来，以免膜内因自由水凝结成冰晶而使细胞损伤。此法操作简便、gao效、保藏期一般可达到5年以上，是目被*的效的菌种保藏技术。

原创作者：上海谷研实业有限公司

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