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细胞被细菌污染的解决办法

点击次数:1061发布时间:2018/2/7

种方法: 抗生素除菌法

在该文中,当一种人喉癌细胞系被怀疑有细菌污染时,研究人员将培养上清液离心,将沉淀物行常规血琼脂培养,培养5-7d后开始出现灰白色细小菌落,经全自动细菌鉴定仪生化鉴定条检测为嗜麦芽寡养食单胞菌,又进行了15种抗生素的药敏实验,发现该菌对其中3种抗生素敏感,其余均耐药,包括对青链霉素耐药。

对多种抗生素耐药的嗜麦芽寡养食单胞菌

图 对多种抗生素耐药的嗜麦芽寡养食单胞菌

接下来,研究人员进行了抗生素*佳抑菌浓度的筛选。每种抗生素配了6个浓度梯度。将受污染的细胞接种到96孔板,加入含敏感抗生素的完全培养液,24 h后换无抗生素培养液培养1d。如此重复3次,连续7d。找出*佳抑菌浓度后,研究人员让细胞分别在抗生素*佳抑菌浓度中传代1代至3代,发现细胞生长良好,但撤离抗生素后,重又出现细菌污染。

作者认为:抗生物主要是抑制细菌生长,而不能完全杀死细菌。因此,有针对性地使用抗生素或许可以短期控制住细胞中污染细菌的生长,但不能根除细菌。

第二种方法: 抗生素联合巨噬细胞吞噬法

即抗生素处理过的细胞再与小鼠的巨噬细胞共培养3d。3d后换液,弃去巨噬细胞。间隔一周后再用巨噬细胞共培养一次。结果显示,此方法效果不佳。

第三种方法: 裸鼠体内接种法

研究人员将受污染的喉癌细胞系细胞按1×106个/ml接种裸鼠腋下皮下,连续观察,当肿物长至约1cm3后,脱颈处死动物,无菌操作取出肿物,做组织细胞培养。

结果显示,肿瘤细胞接种裸鼠体内40 d后开始出现肿块,60d长至1cm3左右。之后将组织块培养于含上述筛选过的三种抗生素的完全培养基,14d后改用无抗生素培养,持续培养3周。结果细胞生长良好。之后自然传代8次,冻存1个月后复苏,细胞仍能贴壁生长。取上清液做细菌培养,结果为无菌生长。

作者认为,细菌在裸鼠体内可被巨噬细胞和中性粒细胞吞噬、NK细胞杀灭,以及被结合抗体的补体杀死。裸鼠体内接种法能彻底杀灭细菌,细胞上清的细菌培养为阴性。细胞生物学特性也保持良好。

因此,敏感抗生素的筛选和使用可以短期清除污染菌,而动物体内接种才是*有效和彻底的除菌方法。虽然上述受污染的细胞属于肿瘤细胞系,但对其他受污染的细胞,也会带来一定的启示。

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