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植物己糖激酶(HK)酶联免疫分析试剂盒操作步骤

点击次数:696发布时间:2020/3/9

植物己糖激酶(HK)酶联免疫分析试剂盒操作步骤
标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因   NaN3抑制辣根过(HRP)活性。
操作步骤
1.  标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.  加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品zui终稀释度为 5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后
37℃温育30分钟。
30倍稀释后备用
配液:将 30倍浓
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静重复 5次,拍干。30秒后弃去,如此
加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
温育:操作同 3。
洗涤:操作同 5。
显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液    50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止液后 15分钟以内进行。

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