人神经星形胶质细胞使用方法:

人神经星形胶质细胞是一种贴壁细胞，细胞形态程梭形、多角形，在Procell技术部 标准操作流程下，细胞可传3代左右；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度 的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞传代

1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；                                                          2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养   瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变  圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；                                                                                        3)用吸管轻轻吹打混匀，按1:2比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5m L，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；                                                    4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后每2-3天换液一次新鲜的完全培养基。

3. 细胞实验

因原代细胞贴壁特殊性，原代细胞在消化后转移至其他实验器皿 (如玻璃爬片、培养

板、共聚焦培养皿等)时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没 贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)，多聚懒氨酸PLL(0.1mg/ml)，     明胶(0.1%)，   依据细胞种类而定。