血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
产品属性:
产品名称 | 辅酶Ⅱ NADP+/NADPH含量试剂盒品牌 |
规格 | 24样 48样 |
检测方法 | 可见分光光度法 微板法 |
货号 | GOY-0163470 |
【试剂盒组成】
1、 微量测试孔:每条8孔,一板12条
2、 标准溶液X6瓶:(1ml/瓶)0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb
3、 高浓度标准品:×1瓶:(1ml/瓶) 100ppb
4、 酶标记物 12ml…………………………红色帽
5、 抗体工作液 7ml…………………………绿色帽
6、 底物液 A液 7ml…………………………棕色帽
7、 底物液 B液 7ml…………………………黑色帽
8、 终 止 液 7ml…………………………黄色帽
9、 20X浓缩洗涤液40ml……………………白色帽
10、 2X浓缩复溶液 50 ml…………………… 蓝色帽
11、 30X浓缩样品提取液 10 ml…………………黑色帽
12、 氧化剂 2 ml…………………… 蓝色管
【样本处理步骤】
样本处理须知
处理任何样本时,都必须注意:
(1) 实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头(2)实验须检查各种实验器具是否干净,必要时对实验器具进 行清洁,避免污染干扰实验结果。
(a)组织样品处理方法:
1、 称取5±0.05g组织样品于50ml离心管中,先加入3ml已稀释好的样品提取液震荡2min;再加入10ml乙腈,充分震荡5min,
2、 加入2g中性氧化铝;震荡2min ,室温4000r/min以上,离心10min;;
3、 取6ml上清液于干净离心管中,加入5ml二氯甲烷震荡3min ,室温4000r/min以上,离心10min;;
4、 取下层清澈液体于玻璃管中,加入20ul氧化剂混匀,在56℃条件下氮气或空气流吹至完全干燥;
5、 加入1ml复溶液,充分溶解干燥残留物。
6、 取100ul 上清液与100ul 已稀释好的复溶液充分混合30s,
7、 取50ul进行分析。
样本稀释倍数: 1倍
(b)水样品处理方法:
1、取50ul 上清液与450ul 已稀释好的复溶液充分混合30s,
2、取50ul进行分析。
样本稀释倍数:10倍
操作步骤:
实验开始,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测
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phospho-M-CSF Receptor(Tyr546) 磷酸化巨噬细胞集落刺激因子受体抗体 规格: 0.1ml
PPIB/Cyclophilin B 亲环蛋白(亲环素)PPIB抗体 规格: 0.2ml
Sclerostin 骨形态发生抑制蛋白SOST抗体 规格: 0.2ml
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