服务流程：

接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

优点：①灵敏度高、特异性强。

         ②时间短，2-3小时出结果。

         ③检测结果可定量。

         ④操作简便。

缺点：①对于已做支原体灭活处理的样品，由于支原体DNA仍旧存在其中，PCR结果会出现假阳性。（可用培养法做补充验证）

         ②不同厂家生产的试剂盒质量差异巨大（由于引物及内在设计不同），需谨慎选择，尽量在业人员推荐指导下使用。

组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

特点

1. 内控对照为独立包装，遵循欧洲药典和日本药典操作流程。

2. 高特异性，一次检测即可涵盖所有常见易感染细胞的支原体物种（包括欧洲药典规定的9种支原体）。与细菌和真核DNA无交叉反应。

3. 高灵敏度，低检测限可达到≤10CFU/ml。

4. 有相应配套的支原体基因组DNA和细菌基因组DNA，便于特异性验证。

5.有相应配套的支原体绝对定量标准品，便于后定量检测。

DH5α电转感受态细  10 X 100微升

铜蓝蛋白活性比色法定量检测试剂盒  20次

组织亚硝酸盐含量比色法定量检测试剂盒  20次

CYTOCHROME C蛋白免疫共沉淀分析试剂盒  5次

细胞COT激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）  20次

P38蛋白表达西方杂交分析试剂盒  5次

组织基质金属蛋白酶（MMP-1）活性荧光定量检测试剂盒  20次

组织硫代酸反应物（TBARS）比色法定量检测试剂盒  20次

定量检测试剂盒  

纯化线粒体膜通道孔（MPTP）荧光检测试剂盒  20次

血液样品组织蛋白酶B（CATHEPSIN B）活性比色法定量检测试剂盒  20次

猪瘟病毒/高致病性猪蓝耳病毒/口蹄疫病毒通用型（CSFV/PRRSV-M/FMDV-U）检测试剂盒 (三重荧光-PCR法)D-虫荧光素钠盐;D-荧光素钠盐 D-Luciferin sodium salt 103404-75-7 质量规格：>98%   细胞BAD蛋白表达荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格：10/50 次

2ˊ,7ˊ-二氯荧光素钠盐 2＇,7＇-Dichlorofluorescein Sodium Salt  80471-69-8  质量规格：>98%   BAD蛋白表达西方杂交分析试剂盒 进口/国产 规格：5次

天青I;天青B Azure I 531-55-5 质量规格：BS  BAD蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 进口/国产 规格：5次

天青II Azure II 37247-10-2 质量规格：BS  BAD蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 进口/国产 规格：25次

天青A Azure A chloride  531-53-3 质量规格：BS   细胞BAX蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次

三氯生 Triclosan 3380-34-5 质量规格：>97%,BR  载玻片细胞BAX蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次

刃天青/树脂天青/刃天青钠 Resazurin 62758-13-8 质量规格：BR,美国biofer进分  冰冻切片组织BAX蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次

天青石蓝 Celestine blue 1562-90-9 质量规格：BS  石蜡切片组织BAX蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次

天青 B 曙红 Azure B eosinate 62298-42-4 质量规格：sigma分装   载玻片细胞BAX蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次

利马列素 Limaprost 74397-12-9 质量规格：>99%   冰冻切片组织BAX蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次

天青II曙红 Azure II eosinate 53092-85-6 质量规格：BS   石蜡切片组织BAX蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格：10/20次

菲律宾菌素;非律平;Filipin Filipin complex from Streptomyces filipinensis 11078-21-0 质量规格：sigma分装   细胞BAX蛋白表达比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：10/50 次

瑞舒伐他汀/罗苏伐他汀游离酸 Rosuvastatin 287714-41-4 质量规格：>97%,游离酸   细胞BAX蛋白表达荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格：10/50 次

苏丹I/溶剂黄14 Sudan I/Solvent Yellow 14 842-07-9 质量规格：BS生物染色   BAX蛋白表达西方杂交分析试剂盒 进口/国产 规格：5次

操作流程

1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。

2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。

3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。

4. 所有试剂在使用应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。

5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用应全部转移至标本准备区，并单独存放。

6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。

7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。

8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。

9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。