产品信息：
产品名称：293 [HEK-293] (人胚肾细胞)
规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
货号：GOY-01X0001
分类：细胞系
产品详细介绍：

名称293 [HEK-293] (人胚肾细胞) (STR鉴定正确) 别称Hek293; HEK-293; HEK 293; HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293 种属人类 年龄（性别）胎儿 组织来源胚胎肾；以腺病毒5DNA进行转化 生长特性贴壁细胞 细胞形态上皮细胞样 背景描述293 [HEK-293]细胞是剪切过的人腺病毒5(Ad5)转染的人胚肾细胞形成的永生化细胞，293 [HEK-293]细胞包含并表达转染的Ad5基因。早期报道中指出，293 [HEK-293]细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA，但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现，Ad5的1-4344位线性核苷酸整合入293 [HEK-293]细胞19号染色体(19q13.2)。293 [HEK-293]细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主，可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体，由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。 生物安全等2 生长培养基MEM（ATCC改良)＋10% FBS＋1% P/S 推荐传代比例1:3-1:4 推荐换液频率2~3次/周 倍增时间~24-30小时 冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮 培养条件 气相：空气，95%；CO₂，5% 温度：37℃ 致瘤性Yes, forms tumors in nude mice. 受体表达情况vitronectin 注意事项该细胞贴壁松散，操作时请尽量轻柔；换液时需预热培养基；收货如有大块脱落的细胞团，为正常现象，请按照收货注意事项处理。

实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

实验报告：

一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
锚蛋白重复结构域蛋白26抗体
丙型肝炎病毒核结合蛋白-1抗体
芳香基硫酸酯酶K抗体
神经元突触膜蛋白抗体
锚定蛋白G抗体
肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体
整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型抗体
整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7抗体
整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7抗体
内收蛋白抗体
脂肪组织分化相关蛋白抗体
脂联素受体1抗体
肾上腺髓质素受体抗体
脂联素抗体
肾上腺髓质素抗体
腺苷受体A3抗体
ADRA2能受体2抗体
能受体β1抗体
能受体β2/β2-AR抗体
晚期糖基化终末产物抗体
软骨蛋白聚糖抗体
5-氨基乙酰丙酸合酶1抗体
p53凋亡刺激蛋白1抗体
P53凋亡刺激蛋白2抗体
激活素受体2B抗体
AIMP2抗体
乙酰胆碱酶抗体
小鼠直肠平滑肌细胞完全培养基100mL芳香基硫酸酯酶1抗体
小鼠小肠平滑肌细胞完全培养基100mL 盐转运三磷酸腺苷酶抗体
小鼠结肠平滑肌细胞完全培养基100mL精氨酸tRNA的蛋白转移酶1抗体
小鼠小肠粘膜上皮细胞完全培养基100mL共济失调蛋白7样1抗体
小鼠肠上皮细胞完全培养基100mL孤独症易感基因2蛋白抗体（自闭症相关蛋白1）
小鼠肠微血管细胞完全培养基100mL脊髓小脑共济失调2型蛋白抗体
小鼠肠巨噬细胞完全培养基100mL芳香基硫酸酯酶H抗体
小鼠子宫内膜上皮细胞完全培养基100mL溴区结构域相邻锌指蛋白1A抗体
小鼠卵巢颗粒细胞完全培养基100mL载脂蛋白1抗体
小鼠子宫颈上皮细胞完全培养基100mL突触融合结合蛋白6抗体
小鼠子宫平滑肌细胞完全培养基100mL精氨酸酶1抗体
小鼠卵巢上皮细胞完全培养基100mL腺苷酸激酶结构域蛋白1抗体
293 [HEK-293] (人胚肾细胞)小鼠子宫成纤维细胞完全培养基100mL三磷酸腺苷结合盒转运蛋白7抗体
小鼠卵巢成纤维细胞完全培养基100mL磷酸化钠钾ATP酶α1多肽抗体
小鼠肾实质细胞完全培养基100mLNa+/K+-ATPase α1 钠钾ATP酶α1抗体
小鼠肾系膜细胞完全培养基100mL肌动蛋白样蛋白6B抗体