RL95-2 (人子宫内膜癌细胞)
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品牌名称：$brandModel.Title(进口品牌)型号： 原产地：中国大陆 发布时间：2022/5/20 13:42:16更新时间：2024/8/20 23:53:57
产品摘要：RL95-2 (人子宫内膜癌细胞) 公司现货出售的商品： 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-secretase 2 0.78-50 ng/mL 人B细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)ELISA试剂盒 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human B-cell lymphoma 3 protein 0.625-40 ng/mL 人骨形成蛋
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蛋白/抗体
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生物菌种
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质粒
试剂盒
生化试剂
PCR检测试剂盒
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标准品
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ＲＮＡ/ＤＮＡ提取
elisa酶联免疫检测试剂盒
详细内容
产品信息：
产品名称：RL95-2 (人子宫内膜癌细胞)
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
产品名称：RL95-2 (人子宫内膜癌细胞)
规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
货号：GOY-01X0196
分类：细胞系
产品详细介绍：名称RL95-2 (人子宫内膜癌细胞)
别称RL-95-2; RL-952; RL952; RL95
种属人类
年龄（性别）女性，65岁
组织来源器官：子宫；组织：内膜；疾病：癌
生长特性贴壁细胞
细胞形态上皮细胞样
背景描述RL95-2细胞有α角蛋白，定义明确的连接复合体，张力丝和表面微绒毛。
生物安全等1
生长培养基DMEM/F12＋5μg/ml Insulin＋10% FBS＋1% P/S
推荐传代比例1:2-1:3
推荐换液频率2~3次/周
倍增时间~22小时
冻存条件
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度：液氮
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
温度：37℃
受体表达情况estrogen receptor, positive
实验要点及说明：1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
| 一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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0.1mL 微量DNA助沉剂 DNADOWN -20℃保存
RL95-2 (人子宫内膜癌细胞) 1mL DNAAcryl助沉剂 Acryl DNADOWN 4℃保存
1g 彩色Acryl助沉剂 Color Acryl DNADOWN 4℃保存
1g 分子生物学糖原干粉 Glycogen Powder 常温
1mL 分子生物学糖原溶液，10mg/mL Glycogen Solution 4℃保存
10mL 微量核酸沉淀剂 NA Precipitation Solution 室温保存
30次 超快非醇核酸沉淀剂 Magic Solution DNABACK 4℃保存
100次 超快非醇核酸沉淀剂 Magic Solution DNABACK 4℃保存
30mL 天净沙核酸浓缩剂 Nucleic Acid Concentration Solution 4℃保存
50次 柱式RNA纯化试剂盒 Column RNAclean-Up 常温保存,RNA洗脱液需要-20℃保存
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