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MV-4-11 (人髓性单核细胞白血病细胞)

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/5/25 10:42:30更新时间:2024/8/20 23:54:11

产品摘要:MV-4-11 (人髓性单核细胞白血病细胞) 公司现货出售的商品: 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Probable 4-hydroxy-2-oxoglutarate aldolase, mitochondrial 0.156-10 ng/mL 人HMG盒蛋白1(HBP1)ELISA试剂盒 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human

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培养基

蛋白/抗体

生化试剂盒

细胞

生物菌种

荧光定量PCR试剂盒

生化检测试剂盒

质粒

试剂盒

生化试剂

PCR检测试剂盒

elisa试剂盒

ATCC\CMCC标准菌株

标准品

ATCC细胞

RNA/DNA提取

elisa酶联免疫检测试剂盒

详细内容

操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
产品信息:
产品名称:MV-4-11 (人髓性单核细胞白血病细胞) 
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
货号:GOY-01X0559
分类:细胞系
产品详细介绍:
名称MV-4-11 (人髓性单核细胞白血病细胞) 
种属人类
年龄(性别)10岁
组织来源外周血
生长特性悬浮细胞
细胞形态淋巴母细胞样
生物安全等1
生长培养基IMDM+10% FBS+1% P/S
推荐传代比例3×10^5-5×10^5cells/mL
推荐换液频率2~3次/周
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
注意事项该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
 

绿色链霉菌 Streptomyces viridis鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus
大鼠神经胶质瘤细胞苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis
酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp.lactisRL1(大鼠肺成纤维样细胞)
绿色木霉异常汉逊酵母 Hansenula anomala
小鼠畸胎瘤细胞天蓝色链霉菌 Streptomyces coelicolor
人支气管平滑肌细胞完全培养基宫颈
嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilus酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
THP-1(人髓系白血病单核细胞)胶冻样芽胞杆菌 Bacillus mucilaginosus
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii I型胶原酶(含100mL酶解缓冲液)
中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii椭圆酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus
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