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HC11 (小鼠乳腺上皮细胞)

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品牌名称:$brandModel.Title(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2022/5/26 8:23:18更新时间:2024/8/20 23:54:11

产品摘要:HC11 (小鼠乳腺上皮细胞)公司现货出售的商品: 7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human Interferon alpha-8 0.312-20 ng/mL 人胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP-7)ELISA试剂盒 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Insulin-like growth factor-binding prot

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培养基

蛋白/抗体

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细胞

生物菌种

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生化检测试剂盒

质粒

试剂盒

生化试剂

PCR检测试剂盒

elisa试剂盒

ATCC\CMCC标准菌株

标准品

ATCC细胞

RNA/DNA提取

elisa酶联免疫检测试剂盒

详细内容

 产品信息:
产品名称:HC11 (小鼠乳腺上皮细胞)
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
货号:GOY-01X0602
分类:细胞系
产品详细介绍:
名称HC11 (小鼠乳腺上皮细胞)
别称HC-11; HC11 Mammary Epithelium
种属小鼠
年龄(性别)雌性,1年
组织来源乳腺
生长特性贴壁细胞
细胞形态上皮细胞样
背景描述This clone was isolated by transfection from the parental cell line COMMA-1D. It was selected for its prolactin induction of beta-casein protein.
生物安全等1
生长培养基RPMI-1640+10% FBS+1%P/S
推荐传代比例1:3-1:6
推荐换液频率2~3次/周
倍增时间~50-80小时 (DSMZ)
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
基因表达情况Undifferentiated cells express Lgals1, Ran, Jam-A and Bmpr1a Differentiated cells express Id1, Nfkbiz, Trib 1, Rps21, ler3
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
 

操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
NCI-H596(人肺腺鳞细胞)胶冻样芽胞杆菌 Bacillus mucilaginosus
肉桂色曲霉 Aspergillus cinnamomeusEAC(小鼠艾氏腹水细胞)
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti泡盛曲霉 Aspergillus awamori
NEC(人食管细胞)白孢链霉菌逝霉素变种 Streptomyces albosporeus var. labilomyceticus
斯氏李斯特氏菌 Listeria seeligeriHep G2, 人肝细胞系
立枯丝核菌 Rhizoctonia solani酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人角膜成纤维细胞完全培养基卵孢白僵菌 Beauveria brongniartii
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大鼠神经胶质瘤细胞
海枣曲霉 Bacillus horikoshii酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp.lactis
苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae绿色木霉=木素木霉
大鼠雪旺氏细胞完全培养基小鼠畸胎瘤细胞
250mL Citrate Buffer(柠檬酸盐缓冲液),0.5M,pH3.5   Citrate Buffer,0.5M,pH3.5   常温保存
250mL Citrate Buffer(柠檬酸盐缓冲液),0.5M,pH4.0   Citrate Buffer,0.5M,pH4.0   常温保存
250mL Citrate Buffer(柠檬酸盐缓冲液),0.5M,pH4.5   Citrate Buffer,0.5M,pH4.5   常温保存
HC11 (小鼠乳腺上皮细胞)250mL Citrate Buffer(柠檬酸盐缓冲液),0.5M,pH5.0   Citrate Buffer,0.5M,pH5.0   常温保存
250mL Citrate Buffer(柠檬酸盐缓冲液),0.5M,pH5.5   Citrate Buffer,0.5M,pH5.5   常温保存
250mL Citrate Buffer(柠檬酸盐缓冲液),0.5M,pH6.0   Citrate Buffer,0.5M,pH6.0   常温保存
250mL Citrate Buffer(柠檬酸盐缓冲液),0.5M,pH7.0   Citrate Buffer,0.5M,pH7.0   常温保存
1000mL Citrate Buffered Saline or SSC,20X,pH7.0 Citrate Buffered Saline or SSC,20X,pH7.0 常温保存
50mL Cobalt Chloride Solution(氯化钴溶液),0.5M Cobalt Chloride Solution,0.5M 常温保存
10mg Denatured Calf Thymus DNA Solution Denatured Calf Thymus DNA Solution 常温保存

热门标签:HC11 (小鼠乳腺上皮细胞) 

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