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G2期/S期应答相关蛋白1抗体
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详细内容
一抗的选择要点和技巧:
一、单克隆和多克隆抗体的选择
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合,就像导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中,一般单克隆抗体特异性强,但亲和力相对小,检测抗原灵敏度相对就低;而多克隆抗体特异性稍弱,但抗体的亲和力强,灵敏度高,但易出现非特异性染色(可以通过封闭等避免)。
二、应用范围的选择
有的一抗只能用于 WB ( Western blotting)或免疫组化、免疫荧光、免疫沉淀等;甚至表明石蜡切片或冰冻切片。购买抗体一定要注意你的需求是什么!
三、种属反应性的选择和来源
这一点很重要,表明这种抗体可能存在种属差异,且这种抗体适合检测哪种种属动物体内的抗原。
一般兔来源的多是多克隆;而小鼠来源的多是单克隆,但也有另外。根据此来源来选择相应的二抗。
本公司所有产品仅供科学实验,不做其他科学实验外的使用!
产品名称 | G2期/S期应答相关蛋白1抗体 |
英文名称 | GTSE1 |
货号 | GOY-01K1485 |
别 名;G2 and S phase-expressed protein 1; B99; B99 homolog; G 2 and S phase expressed 1; G two S phase expressed protein 1; GTSE 1; GTSE-1; GTSE1_HUMAN. 研究域;细胞生物 免疫学 细胞周期蛋白 抗体来源;Rabbit 克隆类型;Polyclonal 交叉反应;Human, Mouse, (predicted: Rat, Chicken, Pig, Cow, ) 产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复) not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user. 理论分子量;77kDa 细胞定位;细胞浆 性 状;Liquid 浓 度;1mg/ml 免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human GTSE1: 651-739/739 亚 型;IgG 纯化方法;affinity purified by Protein A 缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol. 保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. 注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. |
一抗结构:
二抗的原理及特点:
一、SABC法
原理:SABC法是利用链酶亲和素(Streptavidin)与生物素(Biotin)特有的高度亲和力这一生物学性质,先将生物素与辣根过氧化物酶(HRP)结合,形成生物素化HRP,然后与链酶亲和素按一定比例混合,形成SABC复合物。用生物素化二抗与抗体结合,再与SABC复合物联结形成抗原~抗体~生物素化二抗~ SABC复合物。后用底物显色剂显色。
特点:该法具有灵敏度高以及低背景染色等特点。
二、SP法
原理:根据生物素(Biotin) 与链霉亲和素(Streptavidin)具有强结合力的原理设计。在一抗(兔源与鼠源)与相应的靶抗原结合后,生物素化标记的抗多价二抗与一抗特异结合;二抗上标记的生物素与标记了辣根过氧化物酶(HRP)的链霉亲和素结合,形成抗原~特异性一抗~生物素化的二抗~HRP 标记的链霉亲和素复合物。
特点:该法孵育时间短(通常为10min),灵敏度高以及低背景染色等特点。
三. Polymer酶标二抗法
原理:该法采用一段多聚氨基酸聚合物作为载体链,将该多聚物与二抗结合,然后可再标记上多个HRP/AP酶分子,所以同样具有很高的信号放大作用。
特点:灵敏度高;操作步骤简单;无需进行内源性的生物素封闭。
四. 直接酶标二抗法
该法是将HRP/AP酶分子直接标记于二抗上。因此需要普通的酶标二抗即可完成。实验简单,成本低,但是因为没有信号放大作用,所以对很多表达丰度不是很高的抗原就可能检测不到。
一抗和二抗的区别:
抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合。
抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。
一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说,抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答,由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。
一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗)。
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。
二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以如的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物。这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。
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