1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2m,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
shgoy-4927体液钙离子浓度比色法定量检测试剂盒M7931520次
shgoy-4928食物钙离子浓度比色法定量检测试剂盒M7931620次
shgoy-4929环境钙离子浓度比色法定量检测试剂盒M7931720次
shgoy-4930细胞镁离子浓度化学比色法定量检测试剂盒M7931820次
shgoy-4931组织镁离子浓度化学比色法定量检测试剂盒M7931920次
shgoy-4932饮料镁离子浓度化学比色法定量检测试剂盒M7932020次
shgoy-4933食物镁离子浓度化学比色法定量检测试剂盒M7932120次
shgoy-4934环境镁离子浓度化学比色法定量检测试剂盒M7932220次
shgoy-4935细菌镁离子浓度化学比色法定量检测试剂盒M7932320次
shgoy-4936酵母镁离子浓度化学比色法定量检测试剂盒M7932420次
shgoy-4937细胞镁离子浓度酶反应光谱法定量检测试剂盒M7932520次
shgoy-4938组织镁离子浓度酶反应光谱法定量检测试剂盒M7932620次
shgoy-4939饮料镁离子浓度酶反应光谱法定量检测试剂盒M7932720次
shgoy-4940食物镁离子浓度酶反应光谱法定量检测试剂盒M7932820次
shgoy-4941环境镁离子浓度酶反应光谱法定量检测试剂盒M7932920次
shgoy-4942细菌镁离子浓度酶反应光谱法定量检测试剂盒M7933020次
shgoy-4943酵母镁离子浓度酶反应光谱法定量检测试剂盒M7933120次
shgoy-4944细胞短链脂酰辅酶A合成酶(ACYL COA SYNTHETASE)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒M7933220次
shgoy-4945细胞中链脂酰辅酶A合成酶(ACYL COA SYNTHETASE)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒M7933320次
shgoy-4946细胞长链脂酰辅酶A合成酶(ACYL COA SYNTHETASE)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒M7933420次
shgoy-4947细胞脂酰辅酶A合成酶(ACYL COA SYNTHETASE)总活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒M7933520次
shgoy-4948组织短链脂酰辅酶A合成酶(ACYL COA SYNTHETASE)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒M7933620次
shgoy-4949组织中链脂酰辅酶A合成酶(ACYL COA SYNTHETASE)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒M7933720次
shgoy-4950组织长链脂酰辅酶A合成酶(ACYL COA SYNTHETASE)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒M7933820次
shgoy-4951组织脂酰辅酶A合成酶(ACYL COA SYNTHETASE)总活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒M7933920次
shgoy-4952细胞肉毒碱棕榈酰转移酶(CARNITINE PALMITOYL-TRANSFERASE)总活性比色法定量检测试剂盒M7934020次
Sus scrofa; Porcine (Pig)胰高血糖素样肽1(GLP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)成肌分化蛋白(MyoD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)多配体蛋白聚糖1(SDC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
RNase 抑制剂 ( 猪源 )500U包装Mus musculus (Mouse)Discoidin域受体家族成员1(DDR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)微管关联蛋白RP/EB家族成员1(MAPRE1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)骨形成蛋白15(BMP15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)补体受体4(CR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)转醛缩酶(TALDO1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)成纤维细胞生长因子21(FGF21)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)二肽基肽酶10(DPP10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)穿孔素1(PRF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)骨膜蛋白(POSTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Oryctolagus cuniculus (Rabbit)脑源性神经营养因子(BDNF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
General雄烯酮(ADT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)α2-巨球蛋白(α2M)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)泛素结合酶E2A(UBE2A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)Axis抑制蛋白2(AXIN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)端锚聚合酶1(TNKS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)端锚聚合酶2(TNKS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)肌纤蛋白(MYOC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(CPT1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)叉头框蛋白A2(FOXA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)回肠脂肪酸结合蛋白(FABP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)白细胞关联免疫球蛋白样受体2(LAIR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
RNase 抑制剂 ( 猪源 )500U包装技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。