1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2m,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
shgoy-4554细胞EGFR激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7894220次
shgoy-4555组织EGFR激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7894320次
shgoy-4556细胞EPHA1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7894420次
shgoy-4557组织EPHA1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7894520次
shgoy-4558细胞EPHA3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7894620次
shgoy-4559组织EPHA3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7894720次
shgoy-4560细胞EPHB2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7894820次
shgoy-4561组织EPHB2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7894920次
shgoy-4562细胞EPHB3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7895020次
shgoy-4563组织EPHB3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7895120次
shgoy-4564细胞EPHB4激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7895220次
shgoy-4565组织EPHB4激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7895320次
shgoy-4566细胞FAK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7895420次
shgoy-4567组织FAK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7895520次
shgoy-4568细胞FES激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7895620次
shgoy-4569组织FES激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7895720次
shgoy-4570细胞FGFR1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7895820次
shgoy-4571组织FGFR1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7895920次
shgoy-4572细胞FGFR3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7896020次
shgoy-4573组织FGFR3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7896120次
shgoy-4574细胞FGFR4激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7896220次
shgoy-4575组织FGFR4激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7896320次
shgoy-4576细胞FGR激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)M7896420次
Sus scrofa; Porcine (Pig)组蛋白H3(H3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)组蛋白H3(H3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Oryctolagus cuniculus (Rabbit)组蛋白H3(H3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Bos taurus; Bovine (Cattle)半乳凝素8(GAL8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)半乳凝素8(GAL8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)半乳凝素8(GAL8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Sus scrofa; Porcine (Pig)半乳凝素8(GAL8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)半乳凝素8(GAL8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Sus scrofa; Porcine (Pig)胰蛋白酶(TRY)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)双肾上腺皮质激素(DCX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)Ⅲ型胶原α1(COL3α1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)半乳凝素12(GAL12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
RNA 洗脱液10mL包装Mus musculus (Mouse)半乳凝素12(GAL12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)半乳凝素6(GAL6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Bos taurus; Bovine (Cattle)半乳凝素1(GAL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Capra hircus; Caprine (Goat)半乳凝素1(GAL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)半乳凝素1(GAL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)半乳凝素1(GAL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Sus scrofa; Porcine (Pig)半乳凝素1(GAL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)半乳凝素1(GAL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)基质金属蛋白酶15(MMP15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)基质金属蛋白酶15(MMP15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Sus scrofa; Porcine (Pig)基质金属蛋白酶15(MMP15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)S100钙结合蛋白(S100)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)角蛋白1(KRT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)胰岛素降解酶(IDE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)Lacritin蛋白(LACRT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)皮敌菌素(DCD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
RNA 洗脱液10mL包装技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。