1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2m,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
shgoy-214动物血小板线粒体粗提分离试剂盒M7460210次
shgoy-215动物血小板活性线粒体分离试剂盒M7460310次
shgoy-216动物血小板高质纯化线粒体分离试剂盒M7460410次
shgoy-217动物全血线粒体粗提分离试剂盒M7460510次
shgoy-218动物全血活性线粒体分离试剂盒M7460610次
shgoy-219动物全血高质纯化线粒体分离试剂盒M7460710次
shgoy-220纯化线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒M7460820次
shgoy-221动物硬组织线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒M7460920次
shgoy-222动物软组织线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒M7461020次
shgoy-223动物细胞线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒M7461120次
shgoy-224真菌/酵母细胞线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒M7461220次
shgoy-225植物线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒M7461320次
shgoy-226全血线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒M7461420次
shgoy-227动物血小板线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒M7461520次
shgoy-228线粒体蛋白印迹电泳内参蛋白抗体(1000倍)M7461620微克
shgoy-229线粒体呼吸链复合物I(NADH-辅酶Q还原酶)活性定量检测试剂盒M7461720/50次(10样本)
shgoy-230线粒体呼吸链复合物II(琥珀酸-辅酶Q还原酶)活性定量检测试剂盒M7461820次
shgoy-231线粒体呼吸链复合物III(辅酶Q-细胞色素C还原酶)活性定量检测试剂盒M7461920次(10样本)
shgoy-232线粒体呼吸链复合物IV(正铁细胞色素C-氧化还原酶)活性定量检测试剂盒M7462020次
shgoy-233线粒体呼吸链复合物V(F0F1-ATP酶/ATP合成酶)活性定量检测试剂盒 M7462120/50次(10样本)
shgoy-234纯化线粒体膜流动性(membrane fluidity)荧光检测试剂盒M7462220次
shgoy-235海洋动物(虾贝类)线粒体粗提分离试剂盒M7462310/50次
shgoy-236海洋动物(虾贝类)活性线粒体分离试剂盒M7462410/50次
ginsenoside re人参皂苷Re
ginsenoside rd人参皂苷Rd
Ginsenoside Rf人参皂苷Rf
b-D-Glucopyranoside, (3b,6a,12b,24R)-20,24-epoxy-3,12,25-trihydroxydammaran-6-yl (9CI)拟人参皂苷RT5
ginsenoside rc人参皂苷Rc
(R型)人参皂苷Rh1
b-D-Glucopyranoside, (3b,12b,20R)-12,20-dihydroxydammar-24-en-3-yl(R型)人参皂苷Rh2
20(R)-Ginsenoside Rg2(R型)人参皂苷Rg2
Protopanaxatriol(S型)原人参三醇
20(R)Ginsenoside Rg3(R型)人参皂苷Rg3
GINSENOSIDEF1人参皂苷F1
Ginsenoside F2人参皂苷F2
Protopanaxatriol(R型)原人参三醇
20(S)-Ginsenoside Ck人参皂苷CK
PROTOPANAXDIOL(R型)原人参二醇
Ginsenoside Ro人参皂苷Ro
三合一 RNA 上样液 ( 无 EB) 1.5mL包装人参皂苷Rg6
Ginsenoside F3人参皂苷F3
Saikosaponin A柴胡皂苷A
PROTOPANAXDIOL(S型)原人参二醇
Saikosaponin C柴胡皂苷C
柴胡皂苷B
Saikosaponin B2柴胡皂苷B2
Saikosaponin B1柴胡皂苷B1
KAEMPFERITRIN山奈苷
netoginsenoside R1三七皂苷R1
三七皂苷Ft1
b-D-Glucopyranoside, (3b,6a,12b)-3,12,20-trihydroxydammar-24-en-6-yl 2-O-b-D-xylopyranosyl-三七皂苷R2(S型)
三七总皂苷
20(S)-Notoginsenoside R2三七皂苷R2(R型)
Alisol B泽泻醇B
Alisol A泽泻醇A
三合一 RNA 上样液 ( 无 EB) 1.5mL包装技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。