即用型 PCR 试剂盒 3.01 mL价格技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
shgoy-22591,2-苯蒽Magnesium phosphate dibasic trihydrate
shgoy-2260苄脒Magnesium acetate tetrahydrate
shgoy-22612,4-二硝基氯苯Magnesium citrate tetradecahydrate
shgoy-2262碘酸钾Magnesium stearate
shgoy-2263硫酸铝钾Copper
shgoy-2264磷酸氢二钾Copper
shgoy-2265无水磷酸氢二钾Copper
shgoy-2266乙基黄原酸钾Cupric subcarbonate
shgoy-2267酒石酸锑钾Cupferron
shgoy-2268邻苯二甲酸氢钾Cuprizon
shgoy-2269溴化钾Cupric oxide
shgoy-2270无水碳酸钾Cupric oxide
shgoy-2271氯酸钾Cupric sulfide
shgoy-2272铬酸钾Cuprous bromide
shgoy-2273重铬酸钾Cupric bromide
shgoy-2274氟化钾Cupric hydroxide
shgoy-2275氢氧化钾Cuprous iodide
shgoy-2276钾Cuprous oxide
shgoy-2277过硫酸钾Cupric acetate monohydrate
shgoy-2278焦硫酸钾Cupric citrate
Midnolin中脑核仁蛋白抗体
MIF巨噬细胞移动抑制因子抗体
CCL3巨噬细胞炎症因子1α抗体 MIP-1α
muscarinic Acetylcholine Receptor 1毒蕈碱型乙酰胆碱受体M1抗体
MAG髓鞘相关糖蛋白a/b抗体
MEK1 + MEK2丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体
MEK2丝裂原活化蛋白激酶激酶2抗体
Matriptase蛋白裂解酶(一种新的癌基因)抗体
MBP髓鞘碱性蛋白/磷脂碱性蛋白抗体
MelanA黑色素瘤相关抗原/黑色素-A抗体
MCP1单核细胞趋化蛋白1抗体
即用型 PCR 试剂盒 3.01 mL价格MCSF巨噬细胞克隆刺激因子抗体
MDM2双微体2癌基因抗体
Megsin丝氨酸蛋白酶抑制剂B7抗体
Mfn1线粒体融合蛋白1抗体
MGMTO6甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶抗体
MUSK肌肉骨骼受体酪氨酸激酶抗体
Mycobacterium tuberculosis Ag85B杆菌抗体
1-Mar膜相关环指蛋白1抗体
2-Mar膜相关环指蛋白2抗体
3-Mar膜相关环指蛋白3抗体
7-Mar膜相关环指蛋白7抗体
8-Mar膜相关环指蛋白8抗体
9-Mar膜相关环指蛋白9抗体
即用型 PCR 试剂盒 3.01 mL价格操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2m,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。