DNA Shuffling 试剂盒10 次价格技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
shgoy-2162乙酸镁Dibutyl Adipate
shgoy-2163柠檬酸镁DBM
shgoy-2164硬脂酸镁Dibutyl phosphate
shgoy-2165铜粉DBS
shgoy-2166铜片Dicyclohexyl phthalate
shgoy-2167铜丝Diethyl adipate
shgoy-2168碳酸铜P-204
shgoy-2169铜DIOP
shgoy-2170铜铁试剂DOS
shgoy-2171无水硫酸铜DEP
shgoy-2172硫酸铜Diethyl sebacate
shgoy-2173双环己酮草酰二腙Diethyl succinate
shgoy-2174氧化铜粒Dimethyl maleate
shgoy-2175氧化铜丝Dimethyl malonate
shgoy-2176氧化铜粉DMP
shgoy-2177硫化铜DMT
shgoy-2178溴化亚铜Dimethyl sebacate
shgoy-2179溴化铜DNP
shgoy-2180氢氧化铜DOP
shgoy-2181碘化铜Di-n-octyl sebacate
shgoy-2182氧化亚铜EAA
shgoy-2183乙酸铜Ethyl heptanoate
shgoy-2184柠檬酸铜Ethyl laurate
shgoy-2185酒石酸铜Ethyl octanoate
shgoy-2186锡青铜Ethyl oleate
phospho-MEF2C(Thr300)磷酸化肌细胞增强因子2C抗体
Phospho-MEF2A(Thr319)磷酸化肌细胞增强因子2抗体
phospho-MBP(Thr232)磷酸化髓鞘碱性蛋白抗体
phospho-MBP(Tyr203)磷酸化髓鞘碱性蛋白抗体
phospho-MYL6(Tyr29+Ser30)磷酸化肌球蛋白轻链6抗体
phospho-P38 MAPK (Thr180)磷酸化p38MAPK抗体
phospho-p38 MAPK (Tyr323)磷酸化p38MAPK抗体
phospho-MEF2C(Ser396)磷酸化肌细胞增强因子2C抗体
phospho-MAPK8 ( Thr183 + Tyr185)磷酸化氨基末端激酶2抗体
MELK蛋白激酶MPK38抗体
MGST1微粒体谷胱甘肽S转移酶1抗体
MUC13粘蛋白13抗体
MEPE细胞外基质磷酸化抗体
Mast Cell Tryptase肥大细胞蛋白酶7抗体
MAP4微管相关蛋白4抗体
MSS126S蛋白酶调节亚型7抗体
MEG1蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型4抗体
MBOAT4脑肠肽O酰基转移酶抗体
MRG15转录调控因子MRG15抗体
DNA Shuffling 试剂盒10 次价格MLL5髓系/淋巴混合谱系白血病蛋白5抗体
MPV17T淋巴细胞成熟相关蛋白抗体
cblA甲基丙二酸尿症cblA抗体
non-muscle Myosin IIA非平滑肌肌球蛋白2A抗体
MMS19DNA修复甲基磺酸敏感性基因19抗体
C19orf2819号染色体开放阅读框28抗体
Mammaglobin A乳腺珠蛋白1抗体
Myoglobin肌红蛋白抗体
MSH6错配修复蛋白6抗体
DNA Shuffling 试剂盒10 次价格操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2m,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。