1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2m,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
shgoy-3195黄嘌呤英文名称:Xanthine规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-31962-金刚烷醇英文名称:2- adamantane alcohol规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-31975-甲基-7-甲氧基异黄酮英文名称:5- methyl -7- methoxy isoflavone规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-31984-甲氧基水杨酸英文名称:4- methoxy salicylic acid规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3199肌苷英文名称:Inosine规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3200小檗碱(黄连素)英文名称:Berberine (berberine)规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3201苍术酮英文名称:Atractylon规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3202东莨宕碱(东莨菪碱)英文名称:Scopolamine (hyoscine)规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3203异型南五味子丁素英文名称:Heterotypic Kadsura Ding Su规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3204络石苷(络石藤苷)英文名称:Luo Shigan (Trachelospermum jasminoides glycoside)规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3205二氢香豆素英文名称:Two hydrogen coumarin规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3206酒石酸英文名称:Tartaric acid规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3207伊贝碱苷A,辛贝甲素-3β-D-葡萄糖苷英文名称:Irbesartan alkali glycosides A, Xin Beijia prime -3 beta -D- glucoside规格:HPLC≥98% 10mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3208水苏糖英文名称:Stachyose规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3209松柏醛英文名称:Coniferyl aldehyde规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3210松柏醇英文名称:Coniferyl alcohol规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3211西瑞香素英文名称:Daphnetin规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3212雷酚内酯英文名称:Triptophenolide规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
shgoy-3213D-α-生育酚英文名称:D- alpha tocopherol规格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
GRK6G蛋白偶联受体激酶6抗体
GRAF1 Rho GTP酶激活蛋白26抗体
G Protein alpha Inhibitor 1G蛋白α抑制蛋白1抗体
GAS 6生长停滞特异性蛋白6抗体
Glutathione Synthetase谷胱甘肽合成酶抗体
酵母电转感受态细胞制备试剂盒20 次包装GYPB血型糖蛋白δ抗体
GilZ糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白抗体
GGT6γ-谷氨酰转肽酶6抗体
GABRDG氨基丁酸受体δ/GABAA Rδ抗体
GABRG1G氨基丁酸受体γ1/GABAA Rγ1抗体
phospho-GABRG2(Ser366)磷酸化γ氨基丁酸γ2受体抗体
GABRG3G氨基丁酸受体γ3/GABAA Rγ3抗体
GABAREG氨基丁酸受体ε/GABAA Rε抗体
GABARAPγ-氨基丁酸受体相关蛋白抗体
GABRQG氨基丁酸A型受体θ/GABAA Rθ抗体
GABRR1G氨基丁酸A型受体rho1 /GABAA Rρ1抗体
GABRR2G氨基丁酸A型受体rho2 /GABAA Rρ2抗体
GABABRBPG氨基丁酸B型受体结合蛋白抗体
GRID1谷氨酸受体δ1/GluR-δ1抗体
GRINA谷氨酸受体相关蛋白1抗体
GARP环磷酸鸟苷门控通道蛋白CNG4抗体
Glycine Receptor alpha 1 + alpha 2甘氨酸受体α1+甘氨酸受体α2抗体
Glycine Receptor alpha 3甘氨酸受体α3/GlyR α3抗体
GPRC5DG蛋白偶联受体C5家族亚型D抗体
GPR18G蛋白偶联受体18抗体
GPR65G蛋白偶联受体65抗体
Gax生长终止特异性同源盒基因抗体
酵母电转感受态细胞制备试剂盒20 次包装技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。