1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2m,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
shgoy-6211多烯紫杉醇M27246Docetaxel≥99%
shgoy-6212莪二酮(莪术二酮/姜黄二酮) M27247Curdione≥98%
shgoy-6213莪术醇M27248Curcumol≥98%
shgoy-6214二氢丹参酮 IM27249Dihydrotanshi I≥98%
shgoy-6215二氢辣椒素M27250Dihydrocapsaicin≥98%
shgoy-6216二氢麻醉椒苦素M27251Dihidromethysticin≥98%
shgoy-6217二氢石蒜碱M27252Dihydrolycorine≥98%
shgoy-6218二氢杨梅素M27253Dihydromyricetin≥98%
shgoy-6219二氢醉椒素M27254Dihydrokavain≥99%
shgoy-6220番茄红素M27255Lycopene≥95%
shgoy-6221番泻苷AM27256Sennoside A≥98%
shgoy-6222番泻苷CM27257Sennoside C≥97%
shgoy-6223番泻苷DM27258Sennoside D≥97%
shgoy-6224蜂斗菜内酯M27259Bakkenolide≥98%
shgoy-6225佛手柑内酯M27260Bergapten≥95%
shgoy-6226甘氨酸M27261Glycine≥98%
shgoy-6227甘草查尔酮AM27262Licochalcone A≥98%
shgoy-6228甘草苷元-7-O-D-芹糖-4’-O-D-葡萄糖苷M27263Liguiritigenin-7-O-D-apiosyl-4’-O-D-glucoside95%
shgoy-6229甘草素M27264Liquiritigenin≥97%
shgoy-6230甘草酸M27265Glycyrrhizic acid≥98%
Homo sapiens (Human)四加半LIM域蛋白1(FHL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)前胶原赖氨酸-2-酮戊二酸-5-双加氧酶1(PLOD3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)角蛋白1(KRT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)α白蛋白(AFM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)白介素8受体β(IL8Rβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)岩藻糖基转移酶8(FUT8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)溶质载体家族16成员1(SLC16A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人白细胞分离液 1.078200mL包装Homo sapiens (Human)趋化因子C-C-基元受体5(CCR5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)Canopy 2同源物(CNPY2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)转酮醇酶(TKT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)肌球蛋白重链8(MYH8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)B-淋巴酪氨酸激酶(BLK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)电压依赖性阴离子通道蛋白1(VDAC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)线粒体转录因子A(TFAM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)组织蛋白酶Z(CTSZ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)低氧诱导因子2α(HIF2α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)黄嘌呤脱氢酶(XDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)核因子I/X(NFIX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)配对框基因6(PAX6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)血小板膜糖蛋白Ⅰbα多肽(GP1Ba)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)抑制素βE(INHβE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
人白细胞分离液 1.078200mL包装技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。