样品收集、处理及保存方法

1.  血清：使用不含热原的试管，操作过程中避免任何细胞-，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作流程如下：

（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。　

（2）酶标板置4℃，包被过夜。

（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。

（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。　

（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。　

（6）洗板，同（4）。　

（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。　

（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。　

（9）洗板，同（4）。　

（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。　

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。　

（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

3-三氟烟酯208517-35-5

2-溴-4-嘧啶130645-48-6

2-溴四苯醌586-35-6

2-烟3421-76-9

2-酰氨-5-氨吡啶29958-14-3

2-丁-5-硝苯并呋喃133238-87-6

维拉唑酮中间体3-(4-代丁)-5-吲哚143612-79-7

5-(-1-)苯并呋喃-2-甲183288-46-2

5-氨苯并呋喃甲酯174775-48-5

5-硝苯并呋喃-2-羧酯69404-00-8

1-溴-2-甲氧-3-硝苯98775-19-0

3-(S)-(+)-(1－－1,1-二苯)吡咯烷盐194602-27-2

2,3-二-6-氨-2H-吲唑444731-72-0

N-(2-嘧啶-4-)-N－－2,3-二-2H-吲唑-6-胺444731-75-3

2,3-二-6-硝吲唑444731-73-1

3－－6-硝-1H-吲唑6494-19-5

伊索克55453-87-7

[3-(二氨)丙]三磷溴化物盐27710-82-3

3-(S)-(1-甲-1,1-二)吡咯烷-L-酒石盐134002-26-9

(S)-1-对甲苯磺酰-3-(1－－1,1-二苯)吡咯烷133099-09-9

2-氨-4,5-二氟苯甲甲酯207346-42-7

3-溴-2-55289-36-6

2,5-二对二苯甲13799-90-1

2-溴-6-硝苯酚13073-25-1

5-氟-2-硝苯甲320-98-9

2-氟-5-硝苯甲7304-32-7

2-氟-6-硝苯酚1526-17-6

ACF 试剂盒那里有卖3,4-二氟苯甲455-86-7

磷二苄酯1623-08-1

4-碘苄溴16004-15-24-巯基苯甲酸1074-36-84-Mercaptobenzoic acid 4-叔-丁基苯甲醚5396-38-34-TERT-BUTYLANISOLE 叔丁基吡啶3978-81-24-TERT-BUTYLPYRIDINE 4-叔丁氧羰基氨基哌啶73874-95-04-(tert-ButoxycarbonylaMino)piperidine 4-硝基-1，2-苯二胺;4-硝基邻苯二胺; 4-硝基-1,2-二氨基苯; 3,4-二氨基硝基苯99-56-94-Nitro-1,2-phenylenediaMine; 4-硝基邻苯二甲酰亚胺89-40-74-Nitrophthalimide 4-溴-1-丁醇33036-62-34-Bromo-1-butanol 4-溴-7-氮杂吲哚348640-06-24-Bromo-7-azaindole 4-溴苯酚 99％106-41-24-Bromophenol 4-溴苯硼酸5467-74-34-Bromophenylboronic acid 4-氧-2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基2896-70-04-Oxo-2,2,6,6-tetramethylpiperidinooxy 4-乙基-2-甲氧基苯酚2785-89-94-Ethyl-2-methoxyphenol 4-乙基苯磺酸 95％98-69-14-Ethylbenzenesulfonic acid 4-乙炔基-N,N-二17573-94-34＇-DIMETHYLAMINOPHENYL ACETYLENE 4-乙炔联苯29079-00-34-ETHYNYL-1,1＇-BIPHENYL 4-乙烯基-1-环己烯（+4℃）100-40-34-Vinyl-1-cyclohexene 4-乙烯基苯甲酸(含稳定剂BHT)1075-49-64-Vinylbenzoic acid 4-正辛基苯酚, 99％1806-26-44-N-OCTYLPHENOL 5 5-二硫双(1-苯基-1H-四氮唑) 95％5117-7-75,5＇-Dithiobis(1-phenyl-1H-tetrazole) 5-（4-羧基-2-硝基苯氧基）间苯二甲酸 98％143193-46-8