样品收集、处理及保存方法

1.  血清：使用不含热原的试管，操作过程中避免任何细胞-，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作流程如下：

（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。　

（2）酶标板置4℃，包被过夜。

（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。

（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。　

（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。　

（6）洗板，同（4）。　

（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。　

（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。　

（9）洗板，同（4）。　

（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。　

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。　

（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

Boc-D-脯氨醇83435-58-9

Boc-D-苯甘氨醇102089-74-7

N-Boc-L-苯丙氨醇66605-57-0

N-Boc-D-苯丙氨醇106454-69-7

N-Boc-L-缬氨醇79069-14-0

N-Boc-D-缬氨醇106391-87-1

N-Boc-L-异亮氨醇106946-74-1

4-氨基-L-苯丙氨酸943-80-6

吡咯烷-2-甲醇498-63-5

N-甲基-L-脯氨醇34381-71-0

N-苄基-L-脯氨醇53912-80-4

N-甲基-D-脯氨醇99494-01-6

1-甲基-2-吡咯烷甲醇3554-65-2

D-缬氨醇4276-9-9

L-异亮氨醇24629-25-2

3-苯基苄基溴14704-31-5

三(苯硫基)甲烷4832-52-4

反式-@-甲基苯乙烯637-50-3

硫化亚铁1317-37-9

2-甲基-2-硝基丙烷594-70-7

1-(2-溴乙基)-3-氯苯16799-05-6

DL-苏氨酸80-68-2

D-环丝氨酸68-41-7鸡骨常山Alstonia yunnanensisNorfluorocurarine去甲氟箭毒素6880-54-2C19H20N2O≥95% 鸡骨常山Alstonia yunnanensisPicraline匹克拉林碱2671-32-1C23H26N2O5≥95% 鸡骨常山Alstonia yunnanensisPseudoakuammigine脱氧阿枯明2447-70-3C22H26N2O3≥95% 鸡骨常山Alstonia yunnanensisVellosimine維洛斯明鹼6874-98-2C19H20N2O≥95% 鸡骨常山Alstonia yunnanensisVinorine维诺任碱34020-07-0C21H22N2O2≥95% 鸡蛋花Plumeria rubra13-O-p-Coumaroylplumieride13-O-对香豆酰鸡蛋花甙80416-52-0C30H32O14≥97.5% 鸡蛋花Plumeria rubra15-Demethylplumieride15-去甲基鸡蛋花甙132586-69-7C20H24O12≥97.5% 鸡蛋花Plumeria rubraβ-Dihydroplumericinic acidBETA-二氢鸡蛋花素酸59204-61-4C14H14O6≥95% 鸡蛋花Plumeria rubraPlumieride鸡蛋花甙511-