样品收集、处理及保存方法

1.  血清：使用不含热原的试管，操作过程中避免任何细胞-，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作流程如下：

（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。　

（2）酶标板置4℃，包被过夜。

（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。

（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。　

（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。　

（6）洗板，同（4）。　

（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。　

（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。　

（9）洗板，同（4）。　

（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。　

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。　

（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

2-甲氧基-6-甲基50868-73-0

2,4-二甲基51163-29-2

3-(羟甲基)苯甲醛52010-98-7

4-甲磺酰胺基苯胺53250-82-1

6-氨基苯并噻唑533-30-2

1-甲基-4-(4-哌啶基)哌嗪,98%53617-36-0

4-氯哌啶5382-18-3

氨基乙腈硫酸盐5466-22-8

4-(叔丁基二甲基硅氧)环己酮55145-45-4

5-氨基苯并咪唑55299-95-1

(S)-(+)-4-戊烯-2-醇55563-79-6

1-金刚烷基溴甲酮5122-82-7

1-奈硫酚529-36-2

1-溴-3-异丙基苯5433-1-2

2-溴苯乙酰氯55116-09-1

DL-2-氨基-1-环己醇5665-74-7

双(五氟苯基)碳酸59483-84-0

5754-34-7

1-溴-2,4-二硝基苯584-48-5

59507-40-3

2-氯乙氧基-2-乙氧基二乙醇5197-62-6

Α,Α-二甲基苄胺,96%585-32-0

TXB4 试剂盒那里有卖DL-3-氨基-N-丁酸541-48-0

2-溴-3-氟-5-氯吡啶514797-97-8

衣康酸单乙酯57718-07-7

乙胺硫脲56-10-0

55757-46-5

2-氯苯乙酸甲酯57486-68-7

N-哌啶-4-基-乙酰胺5810-56-0黄独Dioscorea bulbiferaTristin5-[2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)乙基]-1,3-苯二酚139101-67-0C15H16O4≥95% 黄独Dioscorea bulbiferaXanthoxylin4＇,6-二甲基-2-羟基苯乙酮90-24-4C10H12O4≥99% 黄柏 Phellodendron amucrense RuprDemethyleneberberine去亚甲基小檗碱25459-91-0C19H18NO4≥98% 黄柏 Phellodendron amucrense RuprObacu黄柏酮751-03-1C26H30O7≥98% 黄柏 Phellodendron amucrense RuprPhellodendrine黄柏碱6873-13-8C20H24NO4≥98% 黄柏 Phellodendron amucrense RuprPhellodendrine chloride盐酸黄柏碱104112-82-5C20H24NO4.Cl≥98% 黄柏 Phellodendron amucrense RuprTetrahydroberberine四氢小檗碱522-97-4C20H21NO4≥98% 槐树 Sophora japonica L.Sophoricoside槐角苷152-95-4C21H20O10≥98% 槐树 S. pachycarpa C. A.Sophocarpine槐果碱78003-71-1C15H22N2O≥98%