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细胞培养的实验器材
点击次数：348 发布时间：2017/10/24 10:59:51
细胞培养离不开各种试剂和耗材，诸如培养基、血清、细胞皿/瓶等，所以预防细胞污染的第二步就是正确处理和使用这些试剂和耗材。如果实验室条件允许，那么*保险的莫过于直接都买商业化试剂和耗材，例如Gibco、Hyclone、ScienCell的试剂，Eppendorf、Corning的耗材等，这些品牌的试剂和耗材只要是正品，品质都没有问题。如果需要自己买干粉配制试剂，那么在试剂配制中的无菌操作也格外重要。另外建议每次试剂配制量不宜过多，比如培养基以1-2周内用完为宜，另分装成小瓶时可考虑再用针头滤器过滤一次，减少细菌污染的可能性。
在准备工作一切就绪后，细胞的处理过程也是大家需要注意的。细胞处理前应将当次实验需要的各种试剂、耗材准备齐备，尽量减少细胞处理过程中的来回走动。安全柜使用前紫外照射30min灭菌，然后通风5min保证换气到位。实验过程中，所有试剂不用就盖上瓶盖，如果需要打开瓶盖，则除了干净的枪头，其他任何东西都不要从瓶口的正上方经过，防止试剂污染。
细胞培养若使用培养皿，则不要长时间打开皿盖。另外移液器也是细胞污染的一个隐藏途径，特别是使用无滤芯枪头的战友，在吸取试剂时，很容易不小心将试剂倒吸入移液器，如果发生这种情况，要及时用酒精棉球擦去倒吸的试剂，特别是培养基，极易成为细菌生长的温床。一把污染的移液器可以轻松污染战友的所有细胞，甚至整个实验室的细胞，所以友情推荐有条件的战友在处理细胞时一定要使用带滤芯的枪头。当然即便是使用带滤芯的枪头，也要尽量避免试剂倒吸，因为想要彻底去除倒吸入移液器的试剂非常困难。
培养箱作为细胞培养的场所，也需要战友留心。由于培养箱内的温度和湿度很高，是很适宜细菌生长的，所以如果有条件（实验室有2个或以上培养箱），定期用75%酒精擦拭培养箱，及时定期更换培养箱内水槽。
那么细胞如果还是不幸污染了，那又该怎么办呢？我把细胞污染分为早期和晚期两种。早期污染是细胞状态变差，但依旧能保持生长，显微镜下（光镜）不可见明显微生物或可见少量微生物，这时候我们在换液时建议多用PBS洗几次，然后用双抗原液侵润细胞1-2min，吸去，再加入正常培养基。
在准备工作一切就绪后，细胞的处理过程也是大家需要注意的。细胞处理前应将当次实验需要的各种试剂、耗材准备齐备，尽量减少细胞处理过程中的来回走动。安全柜使用前紫外照射30min灭菌，然后通风5min保证换气到位。实验过程中，所有试剂不用就盖上瓶盖，如果需要打开瓶盖，则除了干净的枪头，其他任何东西都不要从瓶口的正上方经过，防止试剂污染。
细胞培养若使用培养皿，则不要长时间打开皿盖。另外移液器也是细胞污染的一个隐藏途径，特别是使用无滤芯枪头的战友，在吸取试剂时，很容易不小心将试剂倒吸入移液器，如果发生这种情况，要及时用酒精棉球擦去倒吸的试剂，特别是培养基，极易成为细菌生长的温床。一把污染的移液器可以轻松污染战友的所有细胞，甚至整个实验室的细胞，所以友情推荐有条件的战友在处理细胞时一定要使用带滤芯的枪头。当然即便是使用带滤芯的枪头，也要尽量避免试剂倒吸，因为想要彻底去除倒吸入移液器的试剂非常困难。
培养箱作为细胞培养的场所，也需要战友留心。由于培养箱内的温度和湿度很高，是很适宜细菌生长的，所以如果有条件（实验室有2个或以上培养箱），定期用75%酒精擦拭培养箱，及时定期更换培养箱内水槽。
那么细胞如果还是不幸污染了，那又该怎么办呢？我把细胞污染分为早期和晚期两种。早期污染是细胞状态变差，但依旧能保持生长，显微镜下（光镜）不可见明显微生物或可见少量微生物，这时候我们在换液时建议多用PBS洗几次，然后用双抗原液侵润细胞1-2min，吸去，再加入正常培养基。
早期污染只要发现及时，处理得当，救回来的可能性还是很大的。晚期污染则是细胞形态发生明显改变，细胞停止生长，显微镜下可见明显微生物。这时候我建议大家及时清理掉相关细胞，以免污染其他细胞，重新复苏更早批次的细胞。所以大家会发现，新细胞收到后，不应急于开展实验，而应该先小心培养，冻存1到2个批次的早期细胞，然后再开展实验，这样实验细胞一旦出现问题，可以有库存细胞保证实验还能继续进行。
Crocin II 西红花苷II 55750-84-0 20mg/支
Morin hydrate 桑色素 480-16-0；654055-01-3 20mg/支
D-(−)-Quinic acid D-(-)-奎宁酸 77-95-2 20mg/支
Catalpol 梓醇 2415-24-9 20mg/支
Phlorizin 根皮苷 60-81-1 20mg/支
Ecdysterone 蜕皮激素 5289-74-7 20mg/支
6-gingerol 6-姜酚 23513-14-6 20mg/支
Ligustilide 蒿本内酯 4431-01-0; 81944-09-4 20mg/支
1-Deoxynojirimycin 脱氧野尻霉素 19130-96-2 5mg/支
原创作者：上海谷研实业有限公司
