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技术文章
血清对细胞生长具有促进作用
点击次数：205 发布时间：2017/11/9 10:53:12
血清是一种成分复杂的混合物，且对细胞生长具有促进作用，我们培养细胞离不开血清。那在大规模细胞培养中由血清引起的细胞生长状态不佳及病毒滴度的影响都有哪些表现？大家往下阅读全文便都知晓了。
1、细胞生长速度缓慢，长满单层时间长；从同一细胞瓶中分出两瓶细胞，用同一种培养液，分别加入10％的对照血清和待检血清，在相同条件下培养72小时，会出现对照血清长满单层，而待检血清大约只有60～70％，这种血清就不适合用来大规模培养细胞。
2、细胞传代后形态不正常，细胞状态发生变化 ；由于血清的质量问题，使原本状态正常的细胞经传代后形态会变差；
比如：细胞瓶里会出现一些蠕动的小黑点（并非污染），或者细胞表面形成一层油状覆盖物；细胞的轮廓变得模糊，细胞之间的间隙被血清中的蛋白颗粒填充，从而影响细胞向四周扩展生长。
3、细胞传几代后就出现脱壁现象，不能连续传代 ；质量较差的血清缺乏某种细胞的贴壁因子，会使细胞在传代过程中逐渐丧失贴壁的能力。细胞会从正常的贴壁状态，边缘开始萎缩，上翘。观察到的现象就是细胞表面不光滑，晃动细胞瓶会看到细胞表面有絮状物随培养液波动。随着传代次数增加，细胞萎缩的情况越来越严重，直到*终完全脱壁而死亡。
4、细胞长的很好，致密的单层，状态也很正常，但是接毒后细胞基 本不发生病变，做滴度检测几乎测不出抗原滴度。这种情况也许是因为 血清中含有与接种的病毒有同源的特异性抗体。
比如血清中经常会存在乙脑抗体，牛腹泻病毒抗体等，如果存在这些抗体，就会把接进去的病毒给中和掉。如果抗体滴度很高，病毒会被抗体完全中和，就没有病毒颗粒在细胞中增殖，所以会检测不到病毒滴度。
这种情况给疫苗企业造成的损失是相当大的，不产毒等于前面所做的那么多工作全部白费，浪费人力、物力，尤其是时间上的浪费，从培养细胞开始到接病毒，到收液至少需要一两个月，一旦出现不产毒的情况，那么这一两月时间就白白浪费掉了，这也是牛血清给疫苗企业造成的风险。
1、细胞生长速度缓慢，长满单层时间长；从同一细胞瓶中分出两瓶细胞，用同一种培养液，分别加入10％的对照血清和待检血清，在相同条件下培养72小时，会出现对照血清长满单层，而待检血清大约只有60～70％，这种血清就不适合用来大规模培养细胞。
2、细胞传代后形态不正常，细胞状态发生变化 ；由于血清的质量问题，使原本状态正常的细胞经传代后形态会变差；
比如：细胞瓶里会出现一些蠕动的小黑点（并非污染），或者细胞表面形成一层油状覆盖物；细胞的轮廓变得模糊，细胞之间的间隙被血清中的蛋白颗粒填充，从而影响细胞向四周扩展生长。
3、细胞传几代后就出现脱壁现象，不能连续传代 ；质量较差的血清缺乏某种细胞的贴壁因子，会使细胞在传代过程中逐渐丧失贴壁的能力。细胞会从正常的贴壁状态，边缘开始萎缩，上翘。观察到的现象就是细胞表面不光滑，晃动细胞瓶会看到细胞表面有絮状物随培养液波动。随着传代次数增加，细胞萎缩的情况越来越严重，直到*终完全脱壁而死亡。
4、细胞长的很好，致密的单层，状态也很正常，但是接毒后细胞基 本不发生病变，做滴度检测几乎测不出抗原滴度。这种情况也许是因为 血清中含有与接种的病毒有同源的特异性抗体。
比如血清中经常会存在乙脑抗体，牛腹泻病毒抗体等，如果存在这些抗体，就会把接进去的病毒给中和掉。如果抗体滴度很高，病毒会被抗体完全中和，就没有病毒颗粒在细胞中增殖，所以会检测不到病毒滴度。
这种情况给疫苗企业造成的损失是相当大的，不产毒等于前面所做的那么多工作全部白费，浪费人力、物力，尤其是时间上的浪费，从培养细胞开始到接病毒，到收液至少需要一两个月，一旦出现不产毒的情况，那么这一两月时间就白白浪费掉了，这也是牛血清给疫苗企业造成的风险。
5、细胞生长的状态一般，产毒少，毒价低。这种情况比较常见，细胞是病毒的载体，由于血清质量不好，导致细胞生长状态不好，病毒就无法进行正常的复制。并非所有病毒都不能复制，所以就造成疫苗的效价不够，可能造成不合格产品。
含量测定 140704-200401 700mg
HPLC法含量测定 140705-200602 600mg/支
含量测定 140706-200702 200mg
有关物质检查 140708-200401 100mg
含量测定 140709-201003 50mg
UV法含量测定 140710-200401 20mg
HPLC法含量测定 140711-200702 256μg/支
检查 140713-200501 20mg
含量测定 140715-200501 20mg
原创作者：上海谷研实业有限公司
