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细菌污染的细胞株采取救治方法
点击次数：636 发布时间：2018/5/29 9:57:06
细菌污染的细胞株采取救治方法如下：
1)抗生素法:
细菌培养:用无抗生素完全培养液培养细胞3 d,收集上清离心后将沉淀物接种于血琼脂培养基, 35e培养。
所采用的抗生素包括临床常用的15种抗生素，抗生素*适抑菌浓度筛选:根据细菌药敏实验结果选出敏感抗生素,每种抗生素从抑菌浓度MIC到耐药浓度分别配制6个浓度梯度。将LSC-1细胞按1*104/孔种96孔板,细胞贴壁后加入含敏感抗生素的完全培养液,24 h后换无抗生素培养液培养1 d,如此重复3次,连续7 d。
2)抗生素联合巨噬细胞吞噬法:
将上述抗生素处理过的细胞再用小鼠的巨噬细胞处理。巨噬细胞的制备:将灭菌的玻璃粉与0. 9%氯化钠注射液混和注入小鼠腹腔, 3 d后脱颈处死动物,无菌操作取小鼠腹腔液,离心收集巨噬细胞,与LSC-1细胞混合培养, 3 d后换液,弃去巨噬细胞。间隔一周后再用巨噬细胞共培养一次。
3)裸鼠体内接种法:
将LSC-1细胞按1*106个/mL接种裸鼠腋下皮下,连续观察,当肿物长至约1cm3后,脱颈处死动物,无菌操作取出肿物,采取组织块法做组织细胞培养。
1)抗生素法:
细菌培养:用无抗生素完全培养液培养细胞3 d,收集上清离心后将沉淀物接种于血琼脂培养基, 35e培养。
所采用的抗生素包括临床常用的15种抗生素，抗生素*适抑菌浓度筛选:根据细菌药敏实验结果选出敏感抗生素,每种抗生素从抑菌浓度MIC到耐药浓度分别配制6个浓度梯度。将LSC-1细胞按1*104/孔种96孔板,细胞贴壁后加入含敏感抗生素的完全培养液,24 h后换无抗生素培养液培养1 d,如此重复3次,连续7 d。
2)抗生素联合巨噬细胞吞噬法:
将上述抗生素处理过的细胞再用小鼠的巨噬细胞处理。巨噬细胞的制备:将灭菌的玻璃粉与0. 9%氯化钠注射液混和注入小鼠腹腔, 3 d后脱颈处死动物,无菌操作取小鼠腹腔液,离心收集巨噬细胞,与LSC-1细胞混合培养, 3 d后换液,弃去巨噬细胞。间隔一周后再用巨噬细胞共培养一次。
3)裸鼠体内接种法:
将LSC-1细胞按1*106个/mL接种裸鼠腋下皮下,连续观察,当肿物长至约1cm3后,脱颈处死动物,无菌操作取出肿物,采取组织块法做组织细胞培养。
仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理。
Oxytocin Identification15mg羟可待酮鉴别标准品6233-83-6
15mg多沙唑嗪相关杂质F标准品617677-53-9
15mg米氮平相关物质A标准品61337-68-6
15mg雌二醇相关物质C标准品571-92-6
15mg异丙托溴铵相关物质C标准品552-63-6
15mg卡维地洛相关物质D标准品51997-51-4
15mg格拉司琼相关物质D标准品50890-83-0
15mg维库溴铵相关物质B标准品50587-95-6
15mg羟考酮相关物质C标准品467-13-0
Genistein15mg金雀异黄素标准品446-72-0
Glycitein15mg黄豆黄素标准品40957-83-3
原创作者：上海谷研实业有限公司
