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如何减少细胞光漂白的发生?
点击次数:383 发布时间:2018/9/4 10:20:34
在开展活细胞成像时,如何减少光漂白的发生?通用电气医疗集团(GE Healthcare)的细胞分析应用专家Leanna Ferrand给出了如下建议。
▪ 使用合适的荧光团和荧光蛋白,它们的激发和发射波长应与荧光显微镜匹配。
▪ 在实验过程中,暴露在光照下的时间应尽可能短,光照强度尽可能低。
▪ 避免白白暴露在光照下,比如长时间通过目镜观察样品而不收集数据。
▪ 在设计实验时,全面考虑所有参数,收集到的信息只要能回答手头问题就够了,不要收集太多没用的信息。这些参数包括实验的总时间,成像的频率如何,以及每次使用的荧光通道数量等。
Oxyrase公司的营销部经理Lisa Stewart也提出了一些建议,包括在扫描设置时,采用中性密度(neutral-density)滤光片来减少光照,以及在各个应用中选择光稳定性的染料。
减少光漂白的试剂
▪ 使用合适的荧光团和荧光蛋白,它们的激发和发射波长应与荧光显微镜匹配。
▪ 在实验过程中,暴露在光照下的时间应尽可能短,光照强度尽可能低。
▪ 避免白白暴露在光照下,比如长时间通过目镜观察样品而不收集数据。
▪ 在设计实验时,全面考虑所有参数,收集到的信息只要能回答手头问题就够了,不要收集太多没用的信息。这些参数包括实验的总时间,成像的频率如何,以及每次使用的荧光通道数量等。
Oxyrase公司的营销部经理Lisa Stewart也提出了一些建议,包括在扫描设置时,采用中性密度(neutral-density)滤光片来减少光照,以及在各个应用中选择光稳定性的染料。
减少光漂白的试剂
目前,不少公司已经推出了一些有效的荧光保护剂,可以延缓荧光淬灭的时间。有些试剂是专门为活细胞成像而设计的,有助于活细胞成像研究。根据现有的几种光漂白假说,抗淬灭剂主要针对氧自由基的损伤作用。
无论是采取预防措施,或采用抗淬灭剂,只要您提早规划,就能在更长的时间内尽情成像,避免光漂白的发生,同时让细胞维持健康状态。
原创作者:上海谷研实业有限公司