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dITP 溶液,2.5mM2mL图片
点击次数:145发布时间:2017/11/2 10:36:05
更新日期:2021/11/3 21:55:12
所 在 地:中国大陆
产品型号:
相关标签:RNA/DNA提取
优质供应
详细内容
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
dITP 溶液,2.5mM2mL图片服务流程:
1)客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
dITP 溶液,2.5mM2mL图片 详细介绍:
dITP 溶液,2.5mM2mL图片 详细介绍:
dITP 溶液,2.5mM2mL图片技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
dITP 溶液,2.5mM2mL图片注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定前需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
dITP 溶液,2.5mM2mL图片实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
100168含量测定100168-200602盐酸奈福泮100mg
100169含量测定0169-9402重酒石酸去甲肾上腺素100mg
100208含量测定100208-200102水杨酸镁50mg
100221检查用100221-200301氢醌100mg
100222鉴别100222-200702盐酸罗通定50mg
100223含量测定100223-200102盐酸维拉帕米50mg
100224含量测定100224-200903异维A酸100mg
100225含量测定100225-200502贝诺酯100mg
100226含量测定100226-200404半乳糖50mg
100227供UV法含量测定100227-201001醋酸去氧皮质酮30mg
100228含量测定100228-199802醋酸甲萘氢醌50mg
100229HPLC法含量测定100229-200803富马酸氯马斯汀100mg
Z0007腺嘌呤/腺素/6-氨基嘌呤/胰碱/腺碱/腺尿环/6-氨基尿环/1H-嘌呤-6-胺/Adenine73-24-5RT,避光高纯,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,
25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,
100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,
1公斤,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,
中文名称: 腺嘌呤
其他中文名称: 腺素;6-氨基嘌呤;胰碱;腺碱;腺尿环;6-氨基尿环;1H-嘌呤-6-胺
英文名称: Adenine
其他英文名称: 6-Aminopurine
产品规格: 高纯,98%
包 装: 5克/25克/100克/500克
CAS号:73-24-5
C5H5N5=135.14
级别:High purity grade
含量:≥98.0%
含氮量:50.2~53.4%
熔点:360~365℃
干燥失重:≤1.0%
重金属:≤0.001%
dITP 溶液,2.5mM2mL图片性状:结晶粉末,220℃开始升华,无味。对空气、光敏感。。室温下微溶于水,在100℃时溶解度大增(1:40)得到腺嘌呤三水合物晶体(1g溶于2000ml水,40ml沸水)。溶于酸和碱,微溶于醇,不溶于醚及。水溶液呈中性。具有强烈的咸味。吸收波长(pH 7) 207、260.5nm(ε23200、13400)。
用途:生化研究。具有植物激动素作用,也可应用于组织培养和生化试剂及合成药如维生素B4,嘌呤类药物等原料。微生物方法测定烟酸。病毒、癌症和遗传研究。
保存:RT,避光