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人胚肾细胞；293 [HEK-293]操作步骤
点击次数：135发布时间：2017/11/8 9:55:56
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更新日期：2021/11/4 0:25:07
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：ＡＴＣＣ细胞
优质供应
详细内容
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
细胞名称 人胚肾细胞；293 [HEK-293]操作步骤
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 早期报道中指出该细胞基因组中含有腺病毒5（Ad5）基因组的左侧端和右侧端的DNA，但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点的克隆测序发现，Ad5的1～4344位线性核苷酸整合入细胞染色体19q13.2。该细胞为人类腺病毒载体扩增的宿主。可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体，由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。生物安全级别为2级。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:10~1:20传代，每2~3天换液1次。
传代情况 P20
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：7，12；D13S317：12；D16S539：9，13；D18S51：17，18；D19S433：15，18；D21S11：28，30.2；D2S1338：19；D3S1358：15，17；D5S818：8，9；D7S820：11；D8S1179：12，14；FGA：23；TH01：7，9.3；TPOX：11；vWA：16，19；
同工酶
染色体
使用权限 A类
人胚肾细胞；293 [HEK-293]操作步骤细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
人胚肾细胞；293 [HEK-293]操作步骤注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
Pim-3原癌基因(PIM3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Pim-3 Oncogene (PIM3)Homo sapiens (Human)
Pim-2原癌基因(PIM2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Pim-2 Oncogene (PIM2)Homo sapiens (Human)
甘氨酸脱氢酶(GLDC)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Glycine Dehydrogenase (GLDC)Homo sapiens (Human)
基质金属蛋白酶9(MMP9)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)Homo sapiens (Human)
Ⅱ型胶原(COL2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Collagen Type II (COL2)Homo sapiens (Human)
层粘连蛋白(LN)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Laminin (LN)Homo sapiens (Human)
胱天蛋白酶14(CASP14)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Caspase 14 (CASP14)Homo sapiens (Human)
细胞程序性死亡蛋白1配体1(PDCD1LG1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1 (PDCD1LG1)Homo sapiens (Human)
B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2)Homo sapiens (Human)
凋亡诱导因子(AIF)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Apoptosis Inducing Factor (AIF)Homo sapiens (Human)
Pim-1原癌基因(PIM1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Pim-1 Oncogene (PIM1)Homo sapiens (Human)
成神经细胞瘤抑制瘤变蛋白1(NBL1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Neuroblastoma, Suppression Of Tumorigenicity 1 (NBL1)Homo sapiens (Human)
成神经细胞瘤抑制瘤变蛋白1(NBL1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Neuroblastoma, Suppression Of Tumorigenicity 1 (NBL1)Mus musculus (Mouse)
氨肽酶O(APO)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Aminopeptidase O (APO)Homo sapiens (Human)
阿片肽(OP)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Opioid Peptide (OP)General
血管紧张素1-7(Ang1-7)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Angiotensin 1-7 (Ang1-7)Homo sapiens (Human)
胆酸(CA)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Cholic Acid (CA)General
脱氧胆酸(DC)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Deoxycholate (DC)General
组蛋白(HIS)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Histone (HIS)Homo sapiens (Human)
补体成分4c(C4c)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Complement Component 4c (C4c)Homo sapiens (Human)
激活素A(ACVA)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)CLIA Kit for Activin A (ACVA)Homo sapiens (Human)
beta-Amyloid(35-42) β淀粉样肽/Aβ42抗体 0.1ml
ER α 雌激素受体α抗体 0.1ml
CKLFSF2/CMTM2 趋化素样因子超家族成员2抗体 0.2ml
COX7A2 细胞色素c氧化酶VIIA亚型2抗体 0.1ml
CKLFSF2 isoform 1 趋化素样因子超家族成员2亚型1抗体 0.2ml
MAP65/ASE 1 拟南芥MAP65蛋白抗体 0.2ml
Streptavidin/SA protein 链酶亲和素抗体 0.1ml
human Serum IgA 人血清型免疫球蛋白A抗体 0.2ml
ETFA 电子转移黄素蛋白α抗体 0.2ml
γ-taxilin/LSR5 脂多糖相关反应蛋白5抗体 0.2ml
T4/L-Thyroxine 甲状腺素T4抗体 0.2ml
HLA G(N-Terminus) 人类白细胞抗原G抗体（N端） 0.1ml
HLA G(C-terminal) 人类白细胞抗原G抗体（C端） 0.1ml
hemagglutinin protein/H 麻疹病毒血凝素抗体 0.2ml
WIG-1/PAG608 野生型P53诱导基因1抗体 0.1ml
CD71/TFR/Transferrin receptor 转铁蛋白受体抗体 0.1ml
GAPDH(3E12)-Loading Control 3-磷酸甘油醛脱氢酶单克隆抗体(内参抗体) 0.1ml
GAPDH 3-磷酸甘油醛脱氢酶抗体(内参抗体) 0.1ml
beta-Actin (Loading Control) β-肌动蛋白抗体（内参抗体） 0.1ml
14-3-3(Alpha/Beta/Gamma/Delta/Epsilon) 14-3-3蛋白抗体 0.1ml
phospho-14-3-3 protein zeta/delta(Ser58) 磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗体 0.1ml
14-3-3 family protein 苹果14-3-3蛋白抗体(植物) 1ml
GLI1/Zfp5 脑胶质瘤相关蛋白抗体（锌指蛋白5） 0.1ml
Involucrin 囊包蛋白/内披蛋白抗体 0.2ml
human Fibrinogen 羊抗人纤维蛋白原抗体 0.1ml
S100B/S100 beta S100B蛋白抗体 0.2ml
GDF8 生长分化因子8/肌肉抑制素抗体 0.2ml
2,4-D 2，4-二氯苯氧乙酸(除草剂)抗体 0.2ml
2,4-D(24D1) 2，4-二氯苯氧乙酸(除草剂)单克隆抗体 0.1ml
eIF4EBP1/4EBP1 eIF4E结合蛋白抗体 0.1ml
phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser64) 磷酸化4E结合蛋白1抗体 0.1ml
phospho-eIF4EBP1(Thr37/46) 磷酸化4E结合蛋白1抗体 0.1ml
phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser65/Thr70) 磷酸化eIF4E结合蛋白抗体 0.1ml
phospho-EIF4EBP1(Ser100) 磷酸化eIF4E结合蛋白抗体 0.1ml
phospho-EIF4EBP1(Ser111) 磷酸化eIF4E结合蛋白抗体 0.1ml
EIF5 真核翻译起始因子5抗体 0.2ml
4EBP2 eIF4E结合蛋白2抗体 0.1ml
Cytokeratin 5/CK5 细胞角蛋白5抗体 0.1ml
5-HT 5-羟色胺抗体 0.1ml
HRPT2/CDC73/Parafibromin 甲状旁腺功能亢进蛋白2抗体（细胞分裂周期73） 0.2ml
人胚肾细胞；293 [HEK-293]操作步骤5-HTR1A 5-羟色胺受体1A抗体 0.1ml
THOC2 转录因子THOC2抗体 0.2ml
VEGF 血管内皮生长因子抗体 0.1ml
DNA Ligase IV/LIG4 DNA连接酶4抗体 0.2ml
5-HTR1B 5-羟色胺受体1B抗体 0.1ml
5-HTR2B 5-羟色胺受体2B抗体 0.1ml
