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人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1培养
点击次数:821发布时间:2017/11/8 16:43:34
更新日期:2021/11/4 0:25:07
所 在 地:中国大陆
产品型号:
相关标签:ATCC细胞
优质供应
详细内容
细胞名称 人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1培养
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 取材自引产的15周胚胎组织,中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代;3~4天1次。
传代情况 P5
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1培养 复苏操作要点: 1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1培养 操作步骤:
人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1培养 操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
501-94-0酪醇; 对羟基苯乙醇; 4-羟基苯乙醇Tyrosol;?p-hydroxyphenylethyl alcohol;?4- hydroxy?benzene?ethanolHPLC≥98%,20mg/支
82373-94-22,3,5,4-四羟基二苯乙烯葡萄糖苷2,3,5,4- four?hydroxy two?styrene?glucosideHPLC≥98%,20mg/支
633-65-8盐酸小檗碱;盐酸黄连素Berberine hydrochloride;?berberine hydrochlorideHPLC≥98%,20mg/支
477-90-7岩白菜素BergeninHPLC≥98%,20mg/支
原花青素ProanthocyanidinsUV≥95%,20mg/支
480-41-1柚皮素NaringeninHPLC≥98%,20mg/支
10236-47-2柚皮苷NaringinHPLC≥98%,20mg/支
489-32-7羊藿苷IcariinHPLC≥98%,20mg/支
10097-84-4罗通定;左旋四氢巴马汀;左旋延胡索乙素Luo Tongding?left?four hydrogen;?Bamatin;?levo?tetrahydropalmatineHPLC≥99%,20mg/支
501-98-4对香豆酸P-coumaric?acidHPLC≥98%,20mg/支
91-64-5香豆素CoumarinHPLC≥98%,20mg/支
1994/7/5辛弗林;辛福林碱;辛佛宁;交感醇;昔奈福Synephrine;?Xin Fulin base;?Xin Foning;?synephrine;?with?NefopamHPLC≥98%,20mg/支
CBZ-L-天冬氨酸/N-苄氧羰基-L-天冬氨酸/苯甲氧羰基-L-天门冬氨酸/CBZ-L-天门冬氨酸/Z-L-aspartic acid,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1152-61-0RT特纯,99%25克A0406
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,100克
中文名称: CBZ-L-天冬氨酸
其他中文名称: N-苄氧羰基-L-天冬氨酸;苯甲氧羰基-L-天门冬氨酸;CBZ-L-天门冬氨酸
英文名称: Z-L-aspartic acid
其他英文名称: N-Carbobenzyloxy-L-aspartic acid;Z-Asp-OH;N-CBZ-L-Aspartic acid
产品规格: 特纯,99%
包装:25克/100克/500克
CAS号:1152-61-0
C12H13NO6=267.24
人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1培养级别:Purum
含量:≥99.0%
比旋光度:+8.5~+10.5°(C=2, AcOH)
性状:至类结晶粉末。溶于大多数常规有机溶剂。熔点:117~119℃
用途:生化研究。多肽合成
保存:RT
人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1培养培养温馨提示:
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