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人胚皮肤成纤维细胞；CCC-ESF-1操作步骤
点击次数：300发布时间：2017/11/8 16:48:36
更新日期：2021/11/4 0:25:07
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：ＡＴＣＣ细胞
优质供应
详细内容
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
细胞名称 人胚皮肤成纤维细胞；CCC-ESF-1操作步骤
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 取材自引产的15周胚胎组织，由中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代；3~4天1次。
传代情况 P9
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12；D13S317：8；D16S539：12；D18S51：13，20；D19S433：14.2，16.2；D21S11：29，32.2；D2S1338：19，20；D3S1358：14，15；D5S818：12，13；D7S820：10；D8S1179：13，14；FGA：21，23；TH01：7，9；TPOX：9，10；vWA：16；
同工酶
染色体 46,XY
使用权限 A
人胚皮肤成纤维细胞；CCC-ESF-1操作步骤对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
人胚皮肤成纤维细胞；CCC-ESF-1操作步骤注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
人胚皮肤成纤维细胞；CCC-ESF-1操作步骤细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
520-36-5芹菜素;芹黄素;5,7,4＇-三羟基黄酮Apigenin;?apigenin;?5,7,4 ＇-?three hydroxy?flavoneHPLC≥98%,20mg/支
138-59-0莽草酸Shikimic acidHPLC≥98%,20mg/支
480-36-4蒙花苷LinarinHPLC≥97%,20mg/支
没食子酸Gallic acidHPLC≥98%,10mg/支
149-91-7没食子酸;3,4,5-三羟基苯甲酸Gallic acid;?3,4,5- three?hydroxy?benzoic acidHPLC≥98%,20mg/支
5373/11/5木犀草苷;木犀草素-7-O-葡萄糖苷;青Galuteolin;?luteolin?-7-O- glucoside;?greenHPLC≥98%,20mg/支
491-70-3木犀草素;3＇,4＇,5,7-四羟基黄酮Luteolin;?3 ＇,?4＇,?four 5,7-?hydroxy flavoneHPLC≥98%,20mg/支
84104-71-2雷公藤内酯甲;雷公藤酯甲Wilforlide?a?Tripterygium wilfordii?ester;HPLC≥98%,20mg/支
34157-83-0雷公藤红素;南蛇藤素Tripterine;?celastrineHPLC≥98%,20mg/支
38647-10-8雷公藤乙素;雷公藤羟内酯;雷公藤内酯二醇Tripdiolide;?tripdiolide;?tripdiolideHPLC≥98%,20mg/支
38748-32-2雷公藤甲素;雷公藤内酯醇;雷公藤多甙Triptolide;?triptolide;?Tripterygium wilfordiiHPLC≥98%,20mg/支
153-18-4芦丁;芸香苷;芸香叶苷;维生素P;芦丁芸Rutin;?rutin;?rutin hydrate;?vitamin P;?Lu DingyunUV≥98%,20mg/支
29838-67-3落新妇苷AstilbinHPLC≥98%,20mg/支
66-84-2D-盐酸氨基葡萄糖;D-氨基葡萄糖盐酸盐D-?glucosamine hydrochloride;?D- glucosamine hydrochlorideHPLC≥98%,20mg/支
CBZ-DL-苯丙氨酸/N-苄氧羰基-DL-苯基丙氨酸/N-苄氧羰基-DL-苯丙氨酸/Z-DL-phenylalanine，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，3588-57-6RT特纯，98%10克A0409
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，25克
中文名称： CBZ-DL-苯丙氨酸
其他中文名称： N-苄氧羰基-DL-苯基丙氨酸；N-苄氧羰基-DL-苯丙氨酸
英文名称： Z-DL-Phe-OH
其他英文名称： Z-DL-phenylalanine
产品规格： 特纯，98%
包装：10克/25克
CAS号：3588-57-6
人胚皮肤成纤维细胞；CCC-ESF-1操作步骤C17H17NO4=299.32
级别：Purum
含量：≥98.0%
性状：至类结晶粉末。
用途：生化研究。
保存：RT
