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人肾小管上皮细胞;HKC操作步骤
点击次数:208发布时间:2017/11/8 16:53:16
更新日期:2021/11/4 0:25:07
所 在 地:中国大陆
产品型号:
相关标签:ATCC细胞
优质供应
详细内容
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
细胞名称 人肾小管上皮细胞;HKC操作步骤
形态特性 多角
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞常用于肾小管上皮细胞代谢方面的研究。STR检测发现该细胞被人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2污染。
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 5%FBS
传代方法 1:3传代;2~3天1次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:13;D13S317:9;D16S539:11,12;D18S51:12;D19S433:15,15.2;D21S11:28,30;D2S1338:17,25;D3S1358:16,17;D5S818:12;D7S820:10,11;D8S1179:10,14;FGA:20,22;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:17,18;
同工酶
染色体
使用权限 A类
人肾小管上皮细胞;HKC操作步骤细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
人肾小管上皮细胞;HKC操作步骤对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人肾小管上皮细胞;HKC操作步骤对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
人肾小管上皮细胞;HKC操作步骤注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
87205-99-0二氢丹参酮ITwo hydrogen?tanshi IHPLC≥98%,20mg/支
568-73-0丹参酮ITanshi IHPLC≥98%,20mg/支
C19H17O3?SO3Na丹参酮IIA-磺酸钠; 丹参酮IIA磺酸Sodium tanshi IIA- sulfonate;?tanshi IIA?sulfonic acidHPLC≥98%,20mg/支
568-72-9丹参酮IIATanshi IIAHPLC≥98%;20mg/支
115939-25-8丹酚酸B;丹参酚酸BSalvianolic acid B;?salvianolic acid BHPLC≥98%,20mg/支
96574-01-5丹酚酸A;丹参酚酸ASalvianolic acid A;?salvianolic acid AHPLC≥98%,20mg/支
552-41-0丹皮酚;芍药醇;牡丹酚Paeonol;?paeonol;?paeonolHPLC≥99%,20mg/支
王不留行黄酮苷Semen Vaccariae?Huang TongganHPLC≥98%,20mg/支
27208-80-6虎杖苷;白藜芦醇苷Polydatin;?resveratrol glucosideHPLC≥98%,20mg/支
501-36-0白藜芦醇ResveratrolHPLC≥98%,20mg/支
1135-24-6阿魏酸Ferulic?acidHPLC≥98%,20mg/支
CBZ-L-脯氨酸/N-苄氧羰基-L-脯氨酸/N-羰苄氧基-L-嘌呤/N-CBZ-L-Proline,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1148-11-4RT特纯,99%25克A0414
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,100克
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,500克
中文名称: CBZ-L-脯氨酸
其他中文名称: N-苄氧羰基-L-脯氨酸;N-羰苄氧基-L-嘌呤
英文名称: N-CBZ-L-Proline
其他英文名称: Z-Pro-OH;N-Benzyloxycarbonyl-L-proline
产品规格: 特纯,99%
包装:25克/100克/500克
CAS号:1148-11-4
C13H15NO4=249.26
级别:Purum
含量:≥99.0%
人肾小管上皮细胞;HKC操作步骤熔点:75~77℃
比旋光度:-59~-61o(C=2,ACOH)
性状:细粉末晶体
用途:用于生化试剂,多肽合成
保存:RT