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人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]培养

点击次数:664发布时间:2017/11/9 15:45:18

人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]培养

更新日期:2021/11/4 0:25:07

所 在 地:中国大陆

产品型号:

简单介绍:人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]培养现货直销,免费快递送货上门。公司供应各种细胞株,细胞系,种类齐全,现货,质量保证,公司所有产品仅供科研使用,不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。

相关标签:ATCC细胞 

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详细内容

人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]培养 冷冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
细胞名称  人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]培养
形态特性   成纤维细胞样 
生长特性  贴壁生长
特征特性   Leonard Hayflick建系;有限传代细胞系;寿命为50±10代(倍增时间24h);来自妊娠3个月的正常胚胎肺组织。该细胞系是个用于人疫苗制备的人二倍体细胞;培养基中添加TNFα可以加快细胞生长。 
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS;1%NEAA
传代方法   1:2~1:4传代;2~3天换液1次。
传代情况  P19
冻存条件   基础培养基+8%DMSO+20%FBS 
支原体检测  培养法(-) 
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:16,18;D19S433:13,16.2;D21S11:30,30.2;D2S1338:19,25;D3S1358:16,17;D5S818:10;D7S820:9,11;D8S1179:14;FGA:22,24;TH01:8,9.3;TPOX:8;vWA:19,20;
同工酶  
染色体  
使用权限  A类
人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]培养细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。 
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 
人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]培养对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
 1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
 2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
 3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
 4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]培养注意事项: 
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。 
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。 
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。 
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
 CFN99171http://www.chemfaces.com/natural/Astragaloside-IV-CFN99171.html84687-43-4Astragaloside IVTriterpenoids>=98%C41H68O14784.9820mg
CFN99172http://www.chemfaces.com/natural/Astragaloside-I-CFN99172.html84680-75-1Astragaloside ITriterpenoids>=98%C45H72O16869.110mg
CFN99173http://www.chemfaces.com/natural/Astragaloside-II-CFN99173.html84676-89-1Astragaloside IITriterpenoids>=98%C43H70O15827.0210mg
CFN99177http://www.chemfaces.com/natural/Salidroside-CFN99177.html10338-51-9SalidrosidePhenols>=98%C14H20O7300.3020mg
CFN99179http://www.chemfaces.com/natural/Rosavin-CFN99179.html84954-92-7RosavinPhenylpropanoids>=98%C20H28O10428.4320mg
CFN99455http://www.chemfaces.com/natural/Sweroside-CFN99455.html14215-86-2SwerosideIridoids>=98%C16H22O9358.3 20mg
CFN99185http://www.chemfaces.com/natural/Demethoxycurcumin-CFN99185.html22608-11-3DemethoxycurcuminPhenols>=98%C20H18O5338.3520mg
CFN99186http://www.chemfaces.com/natural/Bisdemethoxycurcumin-CFN99186.html33171-05-0BisdemethoxycurcuminPhenols>=98%C19H16O4308.3320mg
CFN99188http://www.chemfaces.com/natural/Hypericin-CFN99188.html548-04-9HypericinAnthraquis>=98%C30H16O8504.4510mg
FMOC-D-苯丙氨酸/N-芴甲氧羰基-D-苯丙氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-D-苯丙氨酸/N-FMOC-D-苯基丙氨酸/Fmoc-D-Phe-OH,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,86123-10-62~8℃特纯,98%5克A0428
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,25克
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,100克
 
中文名称: FMOC-D-苯丙氨酸 
其他中文名称: N-芴甲氧羰基-D-苯丙氨酸;N-(9-芴甲氧羰基)-D-苯丙氨酸;N-FMOC-D-苯基丙氨酸 
英文名称: Fmoc-D-Phe-OH 
其他英文名称: Fmoc-D-phenylalanine 
产品规格: 特纯,98% 
包装:5克/25克/100克/500克
CAS号:86123-10-6
C24H21NO4=387.43
级别:Purum
含量:≥98.0%
人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]培养熔点:186.9~187.9℃
比旋光度:+35±2°(C=1,DMF)
性状:结晶粉末
用途:生化研究。
保存:2~8℃

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