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人永生化表皮细胞；HaCaT图片
点击次数：201发布时间：2017/11/9 15:46:21
更新日期：2021/11/4 0:25:07
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：ＡＴＣＣ细胞
优质供应
详细内容
细胞名称 人永生化表皮细胞；HaCaT图片
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤，角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 15%FBS
传代方法 1:10～1:20传代，每周换液2～3次
传代情况 C2
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：9，11；D13S317：10，12；D16S539：9，12；D18S51：12；D19S433：13，14；D21S11：30.2；D2S1338：17，25；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：9，11；D8S1179：14；FGA：24；TH01：9.3；TPOX：11，12；vWA：16，17，OL；
同工酶
染色体 72～88
使用权限 A类
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过*易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人永生化表皮细胞；HaCaT图片 操作步骤：
人永生化表皮细胞；HaCaT图片 操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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CFN99198http://www.chemfaces.com/natural/Celastrol-CFN99198.html34157-83-0CelastrolTriterpenoids>=98%C29H38O4450.6120mg
CFN99505http://www.chemfaces.com/natural/Aristolochic-acid-CFN99505.html313-67-7Aristolochic acid AMiscellaneous>=98%C17H11O7N341.2720mg
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CFN99508http://www.chemfaces.com/natural/Sinomenine-CFN99508.html115-53-7SinomenineAlkaloids>=98%C19H23NO4329.3820mg
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CFN99514http://www.chemfaces.com/natural/Colchicine-CFN99514.html64-86-8ColchicineAlkaloids>=98%C22H25NO6399.4420mg
CFN99515http://www.chemfaces.com/natural/Diosgenin-CFN99515.html512-04-9DiosgeninSteroids>=98%C27H42O3414.6320mg
CFN99516http://www.chemfaces.com/natural/Dioscin-CFN99516.html19057-60-4DioscinSteroids>=98%C45H72O16869.0520mg
CFN99520http://www.chemfaces.com/natural/Echinatin-CFN99520.html34221-41-5EchinatinChalcones>=98%C16H14O4270.2820mg
FMOC-L-天冬氨酸/N-芴甲氧羰基-L-天冬氨酸/N-芴甲氧羰基-L-天门冬氨酸/Fmoc-L-天门冬氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-L-天冬氨酸/N-Fmoc-L-Asparagine，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，119062-05-42～8℃特纯，98%5克A0429
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，25克
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，100克
中文名称： FMOC-L-天冬氨酸
其他中文名称： N-芴甲氧羰基-L-天冬氨酸；N-芴甲氧羰基-L-天门冬氨酸；Fmoc-L-天门冬氨酸；N-(9-芴甲氧羰基)-L-天冬氨酸
英文名称： N-Fmoc-L-Asparagine
其他英文名称： Fmoc-Asp-OH；N-[(9H-Fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl]-L-aspartic acid
产品规格： 特纯，98%
包装：5克/25克/100克
CAS号：119062-05-4
C34H32N2O7=580.63
级别：Purum
含量：≥98.0%
人永生化表皮细胞；HaCaT图片熔点：195～200℃
比旋光度：-31.5±1°(c=1 in DMF)
性状：结晶粉末
用途：生化研究。多肽合成
保存：2～8℃
人永生化表皮细胞；HaCaT图片培养温馨提示：
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