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细胞名称 人胚肾细胞;293T价格
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁
特征特性 该细胞由293tsA1609neo衍生而来,含有SV40大T抗原,用于逆转录病毒生产、基因表达和蛋白生产。
培养条件 10%FBS,2mM L-glutamine,1% Penicillin/Streptomycin.
传代方法 1:3-1:8,每周换液2-3次
传代情况
冻存条件 90%FBS+10%DMSO
支原体检测 培养法(-)指示细胞法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D21S11:28,30.2;D3S1358:15,16,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;PentaD:9,10;PentaE:7,15;TH01:7,9.3;TPOX:11;VWA:16,19
同工酶
染色体
使用权限 A类
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人胚肾细胞;293T价格 操作步骤:
人胚肾细胞;293T价格 操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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CFN99909http://www.chemfaces.com/natural/Tetramethylpyrazine-CFN99909.html1124-11-4TetramethylpyrazineMiscellaneous>=98%C8H12N2136.2020mg
CFN99921http://www.chemfaces.com/natural/Tectoridin-CFN99921.html611-40-5TectoridinFlavonoids>=98%C22H22O11462.4020mg
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CFN99923http://www.chemfaces.com/natural/Schizandrin-B-CFN99923.html61281-37-6Schizandrin BLignans>=98%C23H28O6400.4720mg
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CFN99934http://www.chemfaces.com/natural/Alantolactone-CFN99934.html546-43-0AlantolactoneSesquiterpenoids>=98%C15H20O2232.3220mg
FMOC-L-丝氨酸/N-芴甲氧羰基-L-丝氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-L-丝氨酸/Fmoc-Ser-OH,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,73724-45-52~8℃特纯,98%5克A0443
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,25克
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,100克
中文名称: FMOC-L-丝氨酸
其他中文名称: N-芴甲氧羰基-L-丝氨酸;N-(9-芴甲氧羰基)-L-丝氨酸
英文名称: Fmoc-Ser-OH
其他英文名称: Fmoc-L-serine
产品规格: 特纯,98%
包装:5克/25克/100克
CAS号:73724-45-5
C18H17NO5=327.33
级别:Purum
含量:≥98.0%
人胚肾细胞;293T价格熔点:102~106℃
比旋光度:-11.5~-13.5°(C=1,DMF)
性状:结晶粉末
用途:生化研究。多肽合成
保存:2~8℃
人胚肾细胞;293T价格培养温馨提示:
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