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细胞名称 人正常肝细胞;L-02图片
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 L - 02细胞建系鉴定于1980年(叶秀珍等,1980)。该细胞是一株正常肝细胞系,具有典型的肝细胞形态学特征,可用于多种实验研究。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C72
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人正常肝细胞;L-02图片 操作步骤:
人正常肝细胞;L-02图片 操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
CFN90124http://www.chemfaces.com/natural/Gomisin-J-CFN90124.html66280-25-9Gomisin JLignans>=95%C22H28O6388.1910mg
CFN97419http://www.chemfaces.com/natural/Curculigoside-CFN97419.html85643-19-2CurculigosidePhenols>=98%C22H26O11466.4 20mg
CFN90135http://www.chemfaces.com/natural/Protosappanin-B-CFN90135.html102036-29-3Protosappanin BMiscellaneous>=98%C16H16O6304.3010mg
CFN90137http://www.chemfaces.com/natural/Cinobufotalin-CFN90137.html1108-68-5CinobufotalinSteroids>=98%C26H34O7458.5420mg
CFN97435http://www.chemfaces.com/natural/15-16-Dihydrotanshi-I-CFN97435.html87205-99-0Dihydrotanshi IDiterpenoids>=98%C18H14O3278.3 20mg
CFN90142http://www.chemfaces.com/natural/Vinorelbine-Tartrate-CFN90142.html125317-39-7Vinorelbine TartrateAlkaloids>=98%C53H66N4O201079.1120mg
CFN90144http://www.chemfaces.com/natural/Asarinin-CFN90144.html133-04-0(-)-AsarininLignans>=98%C20H18O6354.3520mg
CFN90146http://www.chemfaces.com/natural/Vinblastine-Sulfate-CFN90146.html143-67-9Vinblastine SulfateAlkaloids>=98%C46H58N4O9.H2SO4909.0620mg
CFN90147http://www.chemfaces.com/natural/Yohimbine-CFN90147.html146-48-5YohimbineAlkaloids>=98%C21H26N2O3354.4420mg
CFN90148http://www.chemfaces.com/natural/Sophoricoside-CFN90148.html152-95-4SophoricosideFlavonoids>=99%C21H20O10432.3820mg
阿斯巴甜/阿司帕坦/糖肽/L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯/蛋白糖/甜乐/甜味素/N-L-α-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯/Aspartame,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,22839-47-02~8℃BR,99%100克A0471
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1公斤
中文名称: 阿斯巴甜
其他中文名称: 阿司帕坦;糖肽;L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯;蛋白糖;甜乐;甜味素;N-L-α-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯
英文名称: Aspartame
其他英文名称: Asp-Phe-OMe;H-Asp-Phe-OMe;N-(L-α-Aspartyl)-L-phenylalanine methyl ester;N-L-alpha-Aspartyl-L-phenylalanine 1-Methyl Ester;L-Aspartyl-L-phenylalanine methyl ester
产品规格: BR,99%
包装:5克/25克/100克/500克
CAS号:22839-47-0
C14H18N2O5=294.31
级别:BR
含量:≥99.0%
比旋光度:+14.5~+16.5°
PH:4.5~6.0
人正常肝细胞;L-02图片5-苄基-3.6-二氧-2-哌嗪乙酸:≤1.5%
性状:结晶性粉末。双熔点约190℃和245℃。微溶于水(约1%)和乙醇(0.26mg/100ml)。无臭、有强烈甜味,其稀溶液的甜度约为蔗糖的100-200倍。其甜味与砂糖十分相似,并有清凉感。0.8%水溶液的pH值为4-6.5。在水溶液中不稳定,易分解而失去甜味,低温时和pH值3-5时较稳定
用途:生化研究
保存:2~8℃
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