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人类成纤维细胞系;CNLMG-B5538SKIN培养
点击次数:137发布时间:2017/11/9 16:58:47
更新日期:2021/11/4 0:55:13
所 在 地:中国大陆
产品型号:
相关标签:ATCC细胞
优质供应
详细内容
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C8
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
人类成纤维细胞系;CNLMG-B5538SKIN培养细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
人类成纤维细胞系;CNLMG-B5538SKIN培养对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
冷冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。 人类成纤维细胞系;CNLMG-B5538SKIN培养 注意事项:
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
CFN99532http://www.chemfaces.com/natural/Anemarsaponin-B-CFN99532.html139051-27-7Anemarsaponin BSteroids>=98%C45H74O18903.0420mg
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CFN99536http://www.chemfaces.com/natural/Benzoylpaeoniflorin-CFN99536.html38642-49-8BenzoylpaeoniflorinMonoterpenoids>=98%C30H32O12584.5710mg
CFN99537http://www.chemfaces.com/natural/Eudesmol-CFN99537.html473-15-4beta-EudesmolSesquiterpenoids>=98%C15H26O222.3720mg
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CFN99547http://www.chemfaces.com/natural/Betaine-hydrochloride-CFN99547.html590-46-5Betaine hydrochlorideAlkaloids>=98%C5H12ClNO2153.6020mg
CFN99566http://www.chemfaces.com/natural/Picroside-II-CFN99566.html39012-20-9Picroside IIIridoids>=98%C23H28O13512.4720mg
CFN99568http://www.chemfaces.com/natural/Catechin-hydrate-CFN99568.html7295-85-4(+)-Catechin hydrateFlavonoids>=98%C15H14O6·H2O308.2820mg
FMOC-L-谷氨酸5-叔丁酯/芴甲氧羰基-L-谷氨酸5-叔丁酯/芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-谷氨酸/Fmoc-O-叔丁基-L-谷氨酸/Fmoc-Glu(OtBu)-OH,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,71989-18-92~8°CBR,98%5克A0499
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,25克
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,100克
中文名称: FMOC-L-谷氨酸5-叔丁酯
其他中文名称: 芴甲氧羰基-L-谷氨酸5-叔丁酯;芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-谷氨酸;Fmoc-O-叔丁基-L-谷氨酸
英文名称: Fmoc-Glu(OtBu)-OH
其他英文名称: Fmoc-L-glutamic acid 5-tert-butyl ester
产品规格: BR,98%
包装:5克/25克/100克
CAS号:71989-18-9
C34H40N4O7S=648.77
级别:BR
含量:≥98.0%(HPLC)
人类成纤维细胞系;CNLMG-B5538SKIN培养熔点:87~95℃
比旋光度:-3.0~-7.0°(C=1, 80% Acetic acid)
水分:≤4.0%
性状:粉末
用途:生化研究。
保存:2~8℃
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。