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红色荧光蛋白标记的人胚肾细胞;293T-TdT操作步骤

点击次数:122发布时间:2017/11/10 14:44:04

红色荧光蛋白标记的人胚肾细胞;293T-TdT操作步骤

更新日期:2021/11/4 0:55:13

所 在 地:中国大陆

产品型号:

简单介绍:红色荧光蛋白标记的人胚肾细胞;293T-TdT操作步骤来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

相关标签:ATCC细胞 

优质供应

详细内容

  公司是*专业的ATCC细胞供应商,提供红色荧光蛋白标记的人胚肾细胞;293T-TdT操作步骤的报价,咨询,称技术服务,欢迎来电咨询选购。
细胞名称  红色荧光蛋白标记的人胚肾细胞;293T-TdT操作步骤
形态特性   上皮样 
生长特性  贴壁生长 
特征特性   通过慢病毒感染的方式使293T细胞稳定表达红色荧光蛋白TdT,后经流式分选获得的TdT阳性细胞群。 
培养条件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
传代方法   1:8~10传代;2~3天1次。
传代情况  
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS 
支原体检测  培养法(-) 
STR   Amelogenin:X,X;CSF1PO:11,12,13;D12S391:19,20,21;D13S317:12,12;D16S539:9,10,13;D18S51:17,18;D19S433:17,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19,19;D3S1358:15,16;D5S818:8,9;D6S1043:10,11,12;D7S820:11,11;D8S1179:12,13;FGA:23,24;Penta E:7,15;TH01:7,9.3;TPOX:11,11;vWA:16,
同工酶  
染色体  
使用权限  A类
红色荧光蛋白标记的人胚肾细胞;293T-TdT操作步骤 复苏操作要点: 
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
红色荧光蛋白标记的人胚肾细胞;293T-TdT操作步骤 操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
CFN98144http://www.chemfaces.com/natural/Peimisine-CFN98144.html19773-24-1PeimisineAlkaloids>=98%C27H41NO3427.6210mg
CFN90003http://www.chemfaces.com/natural/Agomelatine-CFN90003.html138112-76-2AgomelatineMiscellaneous>=98%C15H17NO2243.320mg
CFN90004http://www.chemfaces.com/natural/Rasagiline-mesylate-CFN90004.html161735-79-1Rasagiline mesylateMiscellaneous>=98%C13H17NO3S267.3420mg
CFN90005http://www.chemfaces.com/natural/Fingolimod-hydrochloride-CFN90005.html162359-56-0Fingolimod hydrochlorideMiscellaneous>=98%C19H34ClNO2343.9320mg
CFN90006http://www.chemfaces.com/natural/Capecitabine-CFN90006.html154361-50-9CapecitabineAlkaloids>=98%C15H22FN3O6359.3520mg
CFN90007http://www.chemfaces.com/natural/5-Aza-2--deoxycytidine-CFN90007.html2353-33-55-Aza-2'-deoxycytidineAlkaloids>=98%C8H12N4O4228.2120mg
CFN90008http://www.chemfaces.com/natural/Varenicline-tartrate-CFN90008.html375815-87-5Varenicline tartrateAlkaloids>=98%C13H13N3·C4H6O6361.355mg
CFN90009http://www.chemfaces.com/natural/Palonosetron-hydrochloride-CFN90009.html135729-62-3Palonosetron hydrochlorideAlkaloids>=98%C19H25ClN2O332.8720mg
CFN90010http://www.chemfaces.com/natural/Canertinib-CFN90010.html267243-28-7CanertinibAlkaloids>=98%C24H25ClFN5O3485.9420mg
CFN98676http://www.chemfaces.com/natural/Harmine-CFN98676.html442-51-3HarmineAlkaloids>=98%C13H12N2O212.3 20mg
国产B0004十六烷基吡啶盐酸盐/Cetyl pyridinium HC1高纯,99%100克RT
 
中文名称: 十六烷基吡啶盐酸盐 
其他中文名称:  
英文名称: Cetyl pyridinium HC1 
其他英文名称:  
产品规格: 高纯,99% 
包装:100克 
级别:High Purity Grade
C21H38ClN·H2O=357.99
级别:High Purity Grade
含量:≥99.0%
熔点:80~84℃
红色荧光蛋白标记的人胚肾细胞;293T-TdT操作步骤PH(25℃)5.0~7.0
干燥失重:4.5~5.5%
性状:粉末
用途:生化研究
保存:RT
红色荧光蛋白标记的人胚肾细胞;293T-TdT操作步骤培养温馨提示:
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