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EB病毒转化的人B淋巴细胞；KM0501图片
点击次数：118发布时间：2017/11/10 15:28:39
更新日期：2021/11/4 1:25:09
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：ＡＴＣＣ细胞
优质供应
详细内容
细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞；KM0501图片
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞来源于一正常男性的外周血。2005年由中国科学院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:2传代；5-6天一次
传代情况 P7
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR Amelogenin：XY；D8S1179：14,16；D21S11：30,33.2；D7S820：11,12；CSF1PO：10；D3S1358：17；TH01：7， 9；D13S317：8，12；D16S539： 11，12；D2S1338：,17,20；D19S433：13,14；vWA：19；THOX：8；D18S51：14,15；D5S818：10,11 ；FGA：24。
同工酶
染色体
使用权限 A类
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过*易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KM0501图片 操作步骤：
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KM0501图片 操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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CFN90374http://www.chemfaces.com/natural/Crovatin-CFN90374.html142409-09-4CrovatinDiterpenoids>=98%C21H26O6374.435mg
CFN90375http://www.chemfaces.com/natural/Croverin-CFN90375.html76475-17-7CroverinDiterpenoids>=98%C21H22O6370.405mg
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CFN90379http://www.chemfaces.com/natural/Eupalinilide-C-CFN90379.html757202-11-2Eupalinilide CSesquiterpenoids>=98%C20H24O7376.45mg
CFN90380http://www.chemfaces.com/natural/Eupalinilide-D-CFN90380.html757202-14-5Eupalinilide DSesquiterpenoids>=98%C15H19ClO5314.7610mg
CFN90381http://www.chemfaces.com/natural/Eupalinolide-A-CFN90381.html877822-41-8Eupalinolide ASesquiterpenoids>=98%C24H30O9462.4920mg
CFN90382http://www.chemfaces.com/natural/Eupalinolide-B-CFN90382.html877822-40-7Eupalinolide BSesquiterpenoids>=98%C24H30O9462.4920mg
CFN90384http://www.chemfaces.com/natural/Huzhangoside-D-CFN90384.html96315-53-6Huzhangoside DTriterpenoids>=98%C64H104O301353.515mg
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，B0032有机硅消泡剂/Silicone defoamerBR2公斤RT
中文名称： 有机硅消泡剂
英文名称： Silicone defoamer
产品规格： BR
包装：2公斤
级别：BR
水溶性酸或碱（P-H)：6～8
固体含量（136℃×1小时）：≥15%
稳定性：15分钟/2000转
使用方法：本消泡剂可直接用温度为20～35℃的水稀释，操作时边搅动消泡剂边逐渐加入所需剂量的水，维持搅拌至所加的消泡剂均匀分散，稀释时应避免高剪切混合。稀释过的消泡剂不宜久存，时间过长而导致的少量沉淀物并不影响性能，用户将其摇匀后即可使用。为延长稀释过的消泡剂的适用期，用户可用溶解有增稠剂的水溶液来稀释，建议用水溶性高分子为增稠剂，浓度约1～2%
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KM0501图片性状：乳较稠乳状液，具有消泡力强、耐高温、不挥发、化学稳定性高、不易与起泡介质发生化学反应、无毒、生理惰性等特点。
用途：生化研究。用于涂料、发酵、造纸及合成树脂工艺、洗涤、清洗剂等生产工艺过程
保存：RT
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KM0501图片培养温馨提示：
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