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EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0910培养
点击次数:125发布时间:2017/11/10 15:36:01
更新日期:2021/11/4 1:25:09
所 在 地:中国大陆
产品型号:
相关标签:ATCC细胞
优质供应
详细内容
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0910培养
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞系来源于一少精症男性患者的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:2传代;5-6天一次
传代情况 P4
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0910培养细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0910培养对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0910培养对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0910培养注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
CFN90485http://www.chemfaces.com/natural/alpha-Dihydroartemisinin-CFN90485.html81496-81-3alpha-DihydroartemisininSesquiterpenoids>=98%C15H24O5284.3420mg
CFN90488http://www.chemfaces.com/natural/Evodine-CFN90488.html6989-38-4EvodineAlkaloids >=98%C18H19NO5329.3510mg
CFN90489http://www.chemfaces.com/natural/Geraniol-CFN90489.html106-24-1GeraniolMonoterpenoids>=98%C10H18O154.24100mg
CFN90491http://www.chemfaces.com/natural/5-Isopropyl-2-methylphenol-CFN90491.html499-75-25-Isopropyl-2-methylphenolMonoterpenoids>=98%C10H14O150.21100mg
CFN90493http://www.chemfaces.com/natural/Lauric-acid-CFN90493.html143-07-7Lauric acidMiscellaneous>=98%C12H24O2200.31100mg
CFN90494http://www.chemfaces.com/natural/Bornyl-acetate-CFN90494.html5655-61-8Bornyl acetateMonoterpenoids>=98%C12H20O2196.2820mg
CFN92025http://www.chemfaces.com/natural/Acetoxyisovalerylalkannin-CFN92025.html69091-17-4AcetoxyisovalerylalkanninQuis> 98%C23H26O8430.510mg
CFN92028http://www.chemfaces.com/natural/Furanodie-CFN92028.html24268-41-5FuranodieSesquiterpenoids> 95%C15H18O2230.310mg
CFN92030http://www.chemfaces.com/natural/Vicenin--1-CFN92030.html35927-38-9Vicenin -1Flavonoids> 95%C26H28O14564.510mg
B0042-1钯粉/钯;海绵钯/Palladium
中文名称: 钯粉
其他中文名称: 钯;海绵钯
英文名称: Palladium
产品规格: 4N
包装:1克
CAS号:7440-05-3
Pd=106.42
级别:4N
含量:≥99.99%
性状:银灰黑色金属。有延性。商品常制成粉状、海绵状、块状、箔状和丝状等。溶于硝酸、硫酸和王水,微溶于浓盐酸,不溶于水。相对密度(d204)12.02。熔点1555℃。沸点3167℃。粉状有易燃性。
用途:生化研究。催化剂。电镀。制造合金。
保存:RT
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,B0043铬雾抑制剂/Chromic acid fog inhibitorF-53B1公斤83329-89-9RT
中文名称: 铬雾抑制剂
英文名称: Chromic acid fog inhibitor
产品规格: F-53B
包装:1公斤
CAS号:83329-89-9
分子式:C10ClF20KO4S
级别:F-53B
含量:≥98.0%
熔点:285±2℃
性状:微黄色粉末状结晶。铬雾抑制剂主要有:F-53铬雾抑制剂、FC-80铬雾抑制剂(氟辛基磺酸钾)、ZM-830非氟型铬雾抑制剂等
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0910培养用途:生化研究。镀铬通常以高浓度铬酸溶液(CrO3 250g/L,H2SO42.5g/L)为镀铬液。镀铬液的阴极电流效率很差(10%~15%),阳极是用不溶性的铅电极,在两极上急速产生氢和氧,容易形成大量有害的铬雾逸出。这不仅造成很大浪费,而且严重危害操作人员的健康,还使机器、设备等受到腐蚀。镀铬液中添加少量特种表面活性剂作为铬雾抑制剂,使镀铬液的表面张力大大降低,抑制了铬酸雾的生成
保存:RT