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EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0909培养
点击次数：119发布时间：2017/11/10 15:42:30
更新日期：2021/11/4 1:25:09
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：ＡＴＣＣ细胞
优质供应
详细内容
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0909培养
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞系来源于一重度少精症男性患者的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:2传代；5-6天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0909培养细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0909培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0909培养对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0909培养注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
CFN92195http://www.chemfaces.com/natural/Polygalic-acid-CFN92195.html1260-04-4Polygalic acidTriterpenoids> 98%C29H44O6488.720mg
CFN92419http://www.chemfaces.com/natural/Isovanillic-acid-CFN92419.html645-08-9Isovanillic acidPhenols> 98%C8H8O5168.1100mg
CFN92421http://www.chemfaces.com/natural/p-Ethoxybenzoic-acid-CFN92421.html619-86-3p-Ethoxybenzoic acidPhenols> 95%C9H10O3166.2100mg
CFN90503http://www.chemfaces.com/natural/Ophiopogonin-D－－－－-CFN90503.html65604-80-0Ophiopogonin D＇Steroids>=98%C44H70O16855.0210mg
CFN92506http://www.chemfaces.com/natural/3-4-5-Trimethoxy-trans-cinnamic-acid-CFN92506.html20329-98-03,4,5-Trimethoxy-trans-cinnamic acidPhenylpropanoids> 98%C12H14O5238.220mg
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CFN92508http://www.chemfaces.com/natural/Trimethylgallic-acid-CFN92508.html118-41-2Trimethylgallic acidPhenols> 98%C10H12O5212.2100mg
CFN92523http://www.chemfaces.com/natural/Paederoside-CFN92523.html20547-45-9PaederosideIridoids> 98%C18H22O11S446.410mg
CFN92524http://www.chemfaces.com/natural/Paederosidic-acid-CFN92524.html18842-98-3Paederosidic acidIridoids> 98%C18H24O12S464.410mg
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，B0045环偶氮脒类引发剂VA-044/偶氮二异丙基咪唑啉盐酸盐/2,2-偶氮[2-（2-咪唑啉- 2-基）丙烷]二氢氯化物/环偶氮脒类引发剂VAZO44/2,2＇-氮杂双(2-咪唑啉)/偶氮二咪唑啉基丙烷/AIBI高纯，98%100克27776-21-2RT，避光
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，500克
中文名称： 环偶氮脒类引发剂VA-044
其他中文名称： 偶氮二异丙基咪唑啉盐酸盐；2,2-偶氮[2-（2-咪唑啉- 2-基）丙烷]二氢氯化物；环偶氮脒类引发剂VAZO44；2,2＇-氮杂双(2-咪唑啉)；偶氮二咪唑啉基丙烷
英文名称： AIBI
其他英文名称： 2,2’-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane] Dihydrochloride
产品规格： 高纯，98%
包装：25克/100克/500克
CAS号：27776-21-2
级别：High purity grade
含量：≥98%(HPLC)
熔点：188～193℃
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0909培养活化能：108KJ/mol
性状：结晶粉末，不含氰基，是一种水溶性引发剂。溶于水，不溶于甲醇、甲苯等有机溶剂。10h半衰期分解温度：44℃（在水中）
用途：生化研究。用作单体聚丙烯酰胺聚合、苯乙烯乳液聚合及苯乙烯和丙烯酸丁酯的单体聚合等聚合反应的引发剂
保存：RT，避光
