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EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0919培养
点击次数：184发布时间：2017/11/10 15:50:07
更新日期：2021/11/4 1:25:09
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：ＡＴＣＣ细胞
优质供应
详细内容
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0919培养
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞系来源于一重度少精症男性患者的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:2传代；5-6天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0919培养对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0919培养对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0919培养注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
CFN92831http://www.chemfaces.com/natural/Digitonin-CFN92831.html11024-24-1DigitoninSteroids>=98%C56H92O291229.320mg
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CFN97903http://www.chemfaces.com/natural/4-Dihydroxyacetophe-CFN97903.html1197-09-73＇,4＇-DihydroxyacetophePhenols>=98%C8H8O3152.250mg
CFN97923http://www.chemfaces.com/natural/4-Hydroxyphenylacetic-acid-CFN97923.html156-38-74-Hydroxyphenylacetic acidPhenols>=98%C8H8O3152.2100mg
CFN97949http://www.chemfaces.com/natural/Maltol-CFN97949.html118-71-8MaltolFlavonoids>=98%C6H6O3126.1100mg
CFN97963http://www.chemfaces.com/natural/Citropten-CFN97963.html487-06-9CitroptenCoumarins>=98%C11H10O4206.210mg
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，B0046-3司盘80/司班80/油酸山梨醇酯/清凉茶醇油酸酯/油酸清凉茶醇/山梨糖醇酐单油酸酯/失水山梨醇单油酸酯/乳化剂S-80/斯盘80/(Z)-单-9-十八烯酸脱水山梨醇酯/Span 80CP500克1338-43-8RT
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，色固100克
中文名称： 司盘80
其他中文名称： 司班80；油酸山梨醇酯；清凉茶醇油酸酯；油酸清凉茶醇；山梨糖醇酐单油酸酯；失水山梨醇单油酸酯；乳化剂S-80；斯盘80；(Z)-单-9-十八烯酸脱水山梨醇酯
英文名称： Span 80
其他英文名称： Sorbitan monooleate
产品规格： CP
包装：500克
产品规格： 色固
包装：100克
CAS号：1338-43-8
C24H44O6=428.61
级别：CP
酸值：≤8KOHmg/g
皂化值：145～160KOHmg/g
重金属：≤0.001%
灼烧残渣 ：≤0.5%
级别：色固
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0919培养性状：黄至琥珀色黏性油状液体。有脂肪气味。溶于乙醇、异丙醇、矿物油、植物油，不溶于水和丙二醇。相对密度 (d204)1.00～1.05。熔点 10～12℃。亲水亲油值(HLB)4.3。黏度约1000mPa·s(25℃)。闪点 210℃
用途：生化研究。非离子型表面活性剂。水/油型乳化剂。气相色谱固定液(使用温度150℃，溶剂为甲醇)，分离分析含氧化合物。稳定剂。
保存：RT
