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人卵巢畸胎瘤细胞;PA-1图片
点击次数:250发布时间:2017/11/10 16:04:44
更新日期:2021/11/4 1:25:09
所 在 地:中国大陆
产品型号:
相关标签:ATCC细胞
优质供应
详细内容
细胞名称 人卵巢畸胎瘤细胞;PA-1图片
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是从一名12岁的白人女性卵巢畸胎瘤患者的腹腔积液中分离建立的;该细胞可以形成紧密的编织状的克隆,在低血清培养、低密度接种或用5-bromo-2'-deoxyuridine处理时可以分化为胚状体。该细胞表达胚胎抗原PCC4,但未检测到F9的表达。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:4~1:10传代;每周2~3次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,12;D13S317:9,10;D16S539:9,12;D18S51:15,18;D19S433:13;D21S11:29,31.2;D2S1338:24;D3S1358:15;D5S818:11;D7S820:9;D8S1179:14,15;FGA:24;TH01:7,9;TPOX:11;vWA:15,17;
同工酶
染色体 40~46,XX
使用权限 A类
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人卵巢畸胎瘤细胞;PA-1图片 操作步骤:
人卵巢畸胎瘤细胞;PA-1图片 操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,B0055八烷基三甲基氯化铵/辛基三甲基氯化铵/正辛基三甲基氯化铵/Octyltrimethylammonium chlorideBR,99%25克10108-86-8RT
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,100克
中文名称: 八烷基三甲基氯化铵
其他中文名称: 辛基三甲基氯化铵;正辛基三甲基氯化铵
英文名称: Octyltrimethylammonium chloride
其他英文名称: Trimethyloctylammonium chloride
产品规格: BR,99%
包装:25克/100克/500克
CAS号:10108-86-8
C11H26ClN=207.78
级别:BR
人卵巢畸胎瘤细胞;PA-1图片含量:≥99%
性状:结晶粉末,溶于水
用途:生化研究。相转移催化剂,在制药和临床诊断中常用作裂解试剂,用作杀菌剂、乳化剂、消毒剂、抗静电载体
保存:RT。保质期5年
人卵巢畸胎瘤细胞;PA-1图片培养温馨提示:
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