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人卵巢腺癌细胞；SK-OV-3操作步骤
点击次数：265发布时间：2017/11/10 16:06:45
更新日期：2021/11/4 1:25:09
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：ＡＴＣＣ细胞
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详细内容
细胞名称 人卵巢腺癌细胞；SK-OV-3操作步骤
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 SK-OV-3由Trempe G和Old LJ在1973年从一位64岁白人女性卵巢腺癌患者的腹腔积液分离得到。该细胞对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性药物（包括白喉毒素、顺铂和阿霉素）耐受。在裸鼠中成瘤，且形成与卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。
培养条件 McCoy＇s 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS
传代方法 1:2~1:6传代；每周2~3次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：11；D13S317：8，11；D16S539：12；D18S51：16，17，18；D19S433：14，14.2；D21S11：30，31.2；D2S1338：18，23；D3S1358：14；D5S818：11；D7S820：13，14；D8S1179：14，15；FGA：24，25；TH01：9，9.3；TPOX：8，11；vWA：17，18；
同工酶
染色体
使用权限 A类
人卵巢腺癌细胞；SK-OV-3操作步骤培养温馨提示：
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人卵巢腺癌细胞；SK-OV-3操作步骤复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过*易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人卵巢腺癌细胞；SK-OV-3操作步骤 操作步骤：
人卵巢腺癌细胞；SK-OV-3操作步骤 操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
CFN92290http://www.chemfaces.com/natural/Ganoderic-acid-C6-CFN92290.html105742-76-5Ganoderic acid C6Triterpenoids>=98%C30H42O8530.710mg
CFN93249http://www.chemfaces.com/natural/Inosine-CFN93249.html58-63-9InosineAlkaloids>=98%C10H12N4O5268.220mg
CFN98616http://www.chemfaces.com/natural/Naringenin-trimethyl-ether-CFN98616.html38302-15-7Naringenin trimethyl etherFlavonoids>=98%C18H18O5314.310mg
CFN99425http://www.chemfaces.com/natural/Koumine-CFN99425.html1358-76-5KoumineAlkaloids>=98%C20H22N2O306.4 20mg
CFN99127http://www.chemfaces.com/natural/Saikosaponin-B1-CFN99127.html58558-08-0Saikosaponin B1Triterpenoids>=98%C42H68O13780.9820mg
CFN99133http://www.chemfaces.com/natural/Dendrobine-CFN99133.html2115-91-5DendrobineAlkaloids>=98%C16H25NO2263.3820mg
CFN99506http://www.chemfaces.com/natural/Aristolochic-acid-B-CFN99506.html475-80-9Aristolochic acid BMiscellaneous>=98%C16H9NO6311.2510mg
CFN99588http://www.chemfaces.com/natural/3-Butylidenephthalide-CFN99588.html551-08-63-ButylidenephthalideMiscellaneous>=98%C12H12O2188.2250mg
CFN99704http://www.chemfaces.com/natural/Sangge-D-CFN99704.html81422-93-7Sangge DFlavonoids>=98%C40H36O12708.7120mg
CFN99924http://www.chemfaces.com/natural/Schisantherin-B-CFN99924.html58546-55-7Schisantherin BLignans>=98%C28H34O9514.5720mg
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，B0057硫代甜菜碱10/3-(癸基二甲基铵)丙烷-1-磺酸内盐/癸基磺基甜菜碱/3-癸基二甲氨基丙烷磺酸酯/ZWITTERGENT 3-10界面活性剂/SB3-10BR，99%1克15163-36-7RT
中文名称： 硫代甜菜碱10
其他中文名称： 3-(癸基二甲基铵)丙烷-1-磺酸内盐；癸基磺基甜菜碱；3-癸基二甲氨基丙烷磺酸酯；ZWITTERGENT 3-10界面活性剂
英文名称： SB3-10
其他英文名称： Sulfobetaine 10；Caprylyl sulfobetaine；3-(Decyldimethylammonio)-propane-sulfonate inner salt
产品规格： BR，99%
包装：1克/5克/25克
CAS号：15163-36-7
C15H33NO3S=307.49
级别：BR
含量：≥99%
人卵巢腺癌细胞；SK-OV-3操作步骤水分(KF)：≤2.0%
TLC：one spot
性状：粉末，溶于水
用途：生化研究。Zwitterionic类型去垢剂，用于蛋白溶解
保存：RT。保质期5年
