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人横纹肌肉瘤细胞;A-204操作步骤
点击次数:264发布时间:2017/11/10 16:09:35
更新日期:2021/11/4 1:25:09
所 在 地:中国大陆
产品型号:
相关标签:ATCC细胞
优质供应
详细内容
细胞名称 人横纹肌肉瘤细胞;A-204操作步骤
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 在裸鼠中成瘤。
培养条件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS
传代方法 1:6~1:10传代;每周2~3次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,13;D13S317:11,12;D16S539:11,12;D18S51:17,18;D19S433:12,13;D21S11:28,30;D2S1338:17,22;D3S1358:14,17;D5S818:12;D7S820:8,10;D8S1179:13,15;FGA:21;TH01:8,9.3;TPOX:8,9;vWA:15,17;
同工酶
染色体 XX,亚二倍体
使用权限 A类
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人横纹肌肉瘤细胞;A-204操作步骤 操作步骤:
人横纹肌肉瘤细胞;A-204操作步骤 操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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CFN98958http://www.chemfaces.com/natural/Xanthohumol-CFN98958.html569-83-5XanthohumolChalcones> 95%C21H22O5354.4 10mg
CFN90127http://www.chemfaces.com/natural/Dihydrochelerythrine-CFN90127.html6880-91-7DihydrochelerythrineAlkaloids>=98%C21H19NO4349.3810mg
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CFN92023http://www.chemfaces.com/natural/Isobutylshikonin-CFN92023.html52438-12-7IsobutylshikoninQuis> 95%C20H22O6358.410mg
CFN90693http://www.chemfaces.com/natural/Shikonofuran-A-CFN90693.html85022-66-8Shikonofuran AMiscellaneous>=98%C18H20O5316.3510mg
CFN90207http://www.chemfaces.com/natural/Glaucocalyxin-A-CFN90207.html79498-31-0Glaucocalyxin ADiterpenoids>=98%C20H28O4332.4320mg
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,B0060聚季铵盐-10/Polyquaternium-10BR50克68610-92-4或54351-50-7RT
中文名称: 聚季铵盐-10
英文名称: Polyquaternium-10
其他英文名称: Cellulose 2-(2-hydroxy-3-(trimethylammonio)propoxy) ethyl ether chloride;Cellulose ether with a-[2-hydroxy-3-(trimethylammonio)propyl]-w-hydroxypoly(oxy-1,2-ethanediyl) chloride
产品规格: BR
包装:50克
CAS号:68610-92-4或54351-50-7
分子式:(C2H4O)n.C6H16NO2.xCl.xUnspecified
人横纹肌肉瘤细胞;A-204操作步骤级别:BR
Particle Size (-20 Mesh):≥95%
Viscosity:300~500 cps(C=2% Water)
Residue on Ignition (Ash):≤3.0%
性状:褐色粉末
用途:生化研究。
保存:RT
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