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细胞名称 人T淋巴瘤细胞;H9培养
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 H9细胞是HUT78(ATCC TIB 161)的克隆系(Callo,R C,et al)。细胞表面带有CD3、CD4标记。研究表明,该细胞系对人体免疫缺陷病毒(HIV-1)敏感,可用于检测、分离和增殖HIV-1,也可用于其它人类T cell病毒的研究。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C63
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人T淋巴瘤细胞;H9培养 操作步骤:
人T淋巴瘤细胞;H9培养 操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
英文名称:13-Methyl-8,11,13-podocarpatriene-3,12-diolCAS:769140-74-113-甲基-8,11,13-罗汉松科-3,12-二醇用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C18H26O2纯度:Unstable植物来源:
英文名称:24-Methylenecycloartan-3-olCAS:1449-09-824-亚甲基环阿屯醇用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C31H52O纯度:≥90%植物来源:
英文名称:2-C-Methyl-D-erythrono-1,4-lactoneCAS:18465-71-9(3R,4R)-二氢-3,4-二羟基-3-甲基-2(3H)-呋喃酮用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C5H8O4纯度:≥95%植物来源:
英文名称:2-MethoxystypandroneCAS:85122-21-02-甲氧基-6-乙酰基-7-甲基胡桃酮用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C14H12O5纯度:≥98%植物来源:
英文名称:2'-O-Methylbroussonin CCAS:376362-03-71-(4-羟基-2-甲氧基苯基)-3-(4-羟基-3-异戊烯基苯基)丙烷用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C21H26O3纯度:≥95%植物来源:
英文名称:2'-O-MethylhelichrysetinCAS:123316-64-34,4'-二羟基-2',6'-二甲氧基查尔酮用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C17H16O5纯度:≥95%植物来源:
P0079菌种保存培养基/Strain Store Medium,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,常用细菌斜面传代250克RT
中文名称: 菌种保存培养基
英文名称: Strain Store Medium
产品规格: BR
包装:250克
级别:BR
琼脂:4.5g
牛肉粉:5.0g
氯化钠:3.0g
蛋白胨:10.0g
磷酸氢二钠:2.0g
人T淋巴瘤细胞;H9培养PH值:7.4~7.6g
用法:称取本品24.5克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装于螺旋盖试管内的3/4左右高度,121℃高压灭菌15分钟备用
性状:粉末。易潮解。
用途:生化研究。用于常见细菌斜面传代
保存:RT
人T淋巴瘤细胞;H9培养培养温馨提示:
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