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小鼠皮肤成纤维样细胞；C57/B6-S操作步骤
点击次数：118发布时间：2017/11/30 9:01:49
更新日期：2021/11/4 10:25:13
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：ＡＴＣＣ细胞
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详细内容
细胞名称 小鼠皮肤成纤维样细胞；C57/B6-S操作步骤
形态特性 成纤维样细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一正常雄性C57/B6小鼠的皮肤组织。2013年由中科院昆明细胞库建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:2传代；3-4天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR -
同工酶 无
染色体
使用权限 A类
小鼠皮肤成纤维样细胞；C57/B6-S操作步骤操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
小鼠皮肤成纤维样细胞；C57/B6-S操作步骤复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过*易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
小鼠皮肤成纤维样细胞；C57/B6-S操作步骤培养温馨提示：
1）公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代，不能用于人体实验和临床诊断、治疗。
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4）使用者在接收、处理、保存、丢弃、转让及使用细胞的时候要遵守国内外有关的法律法规，充分考虑可能存在的风险和责任，采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。
CAS：484-12-8公式：C15H16O3纯度：≥98%植物来源：蛇床子素用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。英文名称：Osthole
CAS：28342-33-8公式：C21H17NO5纯度：≥95%植物来源：氧基白屈菜季铵碱用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。英文名称：Oxychelerythrine
CAS：16837-52-8公式：C15H24N2O2纯度：≥98%植物来源：氧化苦参碱用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。英文名称：Oxymatrine
CAS：39011-91-1公式：C23H28O12纯度：≥98%植物来源：氧化芍药苷用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。英文名称：Oxypaeoniflorin
CAS：737-52-0公式：C16H14O5纯度：≥98%植物来源：氧化前胡素用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。英文名称：Oxypeucedanin
CAS：29700-22-9公式：C14H12O4纯度：≥98%植物来源：氧化白藜芦醇用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。英文名称：Oxyresveratrol
Q1451玻璃纤维/纤维玻璃/玻璃棉/玻璃绒/玻璃纤维棉/纤维玻璃棉/直纤维/玻璃微球/硼硅酸铝钙/Glass FiberBR65997-17-3RT500克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，
中文名称： 玻璃纤维
其他中文名称： 纤维玻璃；玻璃棉；玻璃绒；玻璃纤维棉；纤维玻璃棉；直纤维；玻璃微球；硼硅酸铝钙
英文名称： Glass Fiber
其他英文名称： Fiber Glass Wool
产品规格： BR
包 装： 250克
CAS号：65997-17-3
SiO2=60.08
小鼠皮肤成纤维样细胞；C57/B6-S操作步骤级别：BR
含量(以金属氧化物计)：11.0～25.0%
密度：1.05～1.15g/ml
性状：系由玻璃纤维制成的羊毛状物质或粉末。有优良耐热性(一般能耐350℃)。热绝缘性和吸音性
用途：生化研究。化学实验,过滤。
保存：RT
