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抗人肝癌单抗HAb18杂交瘤细胞;HAb18操作步骤
点击次数:78发布时间:2017/11/30 9:04:27
更新日期:2021/11/4 10:25:13
所 在 地:中国大陆
产品型号:
相关标签:ATCC细胞
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详细内容
细胞名称 抗人肝癌单抗HAb18杂交瘤细胞;HAb18操作步骤
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 产生单克隆抗体为IgG1型;FCM(+),WB(+),ELISA(+),ICH(+)。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C25
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
抗人肝癌单抗HAb18杂交瘤细胞;HAb18操作步骤 操作步骤:
抗人肝癌单抗HAb18杂交瘤细胞;HAb18操作步骤 操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
CAS:32971-25-8公式:C24H26O8纯度:≥95%植物来源:二乙酸-(+)-松脂醇酯用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。英文名称:(+)-Pinoresinol diacetate
CCAS:70110-61-1公式:C31H56O2纯度:≥95%植物来源:5-二十五烷基间苯二酚用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。英文名称:5-Pentacosylresorcinol
CAS:1246926-09-9公式:C27H32O8纯度:≥95%植物来源:5,7,4'-三羟基-3'-(4-羟基-3-甲基丁基)-5'-(3-甲基丁-2-烯基)-3,6-二甲氧基黄酮用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。英文名称:5'-Prenylaliarin
CAS:68097-13-2公式:C20H18O5纯度:≥99%植物来源:6-异戊烯基芹菜甙元用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。英文名称:6-Prenylapigenin
CAS:23417-92-7公式:C18H19NO4纯度:≥95%植物来源:7-异戊烯氧基-gamma-花椒碱用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。英文名称:7-Prenyloxy-γ-Fagarine
CAS:135384-00-8公式:C20H18O4纯度:≥98%植物来源:8-异戊烯基大豆苷元用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。英文名称:8-Prenyldaidzein
Q14562-氨基嘧啶/2-嘧啶基胺/2-嘧啶胺/2-AminopyrimidineBR,99%109-12-6RT,避光100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,
500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,
中文名称: 2-氨基嘧啶
其他中文名称: 2-嘧啶基胺;2-嘧啶胺
英文名称: 2-Aminopyrimidine
其他英文名称: Pyrimidone-2-imide
产品规格: BR,99%
包 装: 25克/100克/500克
CAS号:109-12-6
C4H5N3=95.10
抗人肝癌单抗HAb18杂交瘤细胞;HAb18操作步骤级别:BR
含量:≥99.0%(GC)
熔点:124~127℃
性状:无色或微黄色针状结晶。对光敏感。能升华。溶于水。有刺激性
用途:生化研究。有机合成。
保存:RT,避光
抗人肝癌单抗HAb18杂交瘤细胞;HAb18操作步骤培养温馨提示:
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