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抗人SH3-结构域结合蛋白单抗杂交瘤细胞；SH3-domain binding protein操作步骤
点击次数：79发布时间：2017/11/30 9:17:23
更新日期：2021/11/4 10:25:13
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：ＡＴＣＣ细胞
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详细内容
细胞名称 抗人SH3-结构域结合蛋白单抗杂交瘤细胞；SH3-domain binding protein操作步骤
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 产生单克隆抗体为IgG1型；ELISA(+)。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C23
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过*易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
抗人SH3-结构域结合蛋白单抗杂交瘤细胞；SH3-domain binding protein操作步骤 操作步骤：
抗人SH3-结构域结合蛋白单抗杂交瘤细胞；SH3-domain binding protein操作步骤 操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
CAS：56755-22-7公式：C12H17NO2纯度：≥95%植物来源：苯丙氨酸甜菜碱用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。英文名称：Phenylalanine betaine
CAS：1260-05-5公式：C32H52O3纯度：≥95%植物来源：马尾杉醇 C用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。英文名称：Phlegmanol C
CAS：480-66-0公式：C8H8O4纯度：≥95%植物来源：2,4,6-三羟基苯乙酮用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。英文名称：Phloracetophe
CAS：60-82-2公式：C15H14O5纯度：≥98%植物来源：根皮素用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。英文名称：Phloretin
CAS：288248-46-4公式：C19H28O13纯度：≥95%植物来源：环烯醚萜 B用途：本品用于含量测定，药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告，因为品质是企业的决战场，是基业长青的保证，我公司提供的一切产品仅供科研，实验室用，不得用于注射，食用或者其他用途。英文名称：Phlorigidoside B
Q1476薄荷脑/（-）-薄荷醇/L-薄荷醇/天然薄荷脑/1R-(1α,2β,5α)]-5-甲基-2-(1-甲基乙基)环己醇/L-孟醇/(1R,2S,5R)-2-异丙基-5-甲基环己醇/薄荷冰/对烷-3-醇/萜醇-[3]/MentholBR，98%2216-51-5RT200克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，
中文名称： 薄荷脑
其他中文名称： （-）-薄荷醇；L-薄荷醇；天然薄荷脑；1R-(1α,2β,5α)]-5-甲基-2-(1-甲基乙基)环己醇；L-孟醇；(1R,2S,5R)-2-异丙基-5-甲基环己醇；薄荷冰；对烷-3-醇；萜醇-[3]
英文名称： Menthol
其他英文名称： L-Menthol；L-p-Menthan-3-ol；(1R,2S,5R)-(-)-Menthol; (1R,2S,5R)-2-Isopropyl-5-methylcyclohexanol
产品规格： BR，98%
包 装： 200克
CAS号：2216-51-5
C10H20O=156.27
级别：BR
含量：≥98.0%
熔点：41.0～43.5℃
性状：无色针状结晶或粒状。微溶于水，溶于乙醇 、丙酮、、苯。薄荷醇氢化生成对烷。沸点：212℃，密度：0.890，折光率1.46 ，闪点93℃
抗人SH3-结构域结合蛋白单抗杂交瘤细胞；SH3-domain binding protein操作步骤用途：生化研究。薄荷醇是一种萜，为薄荷和欧薄荷精油中的主要成分，以游离和酯的状态存在。薄荷醇可分为三种光学异构体，即具有光学特性的L-薄荷醇、具有右旋光学特性的d-薄荷醇和不具有光学特性的dl-薄荷醇 ，又称为消旋薄荷醇。而其中清凉度和香气品质*佳的就是纯天然的L-薄荷醇，又称薄荷醇。薄荷醇具有薄荷香气并有清凉的作用，消旋薄荷醇也有清凉作用，其他的异构体无清凉作用
保存：RT
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