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小鼠杂交瘤细胞;2B10G10D10F7操作步骤
点击次数:56发布时间:2017/11/30 10:34:27
更新日期:2021/11/4 10:25:13
所 在 地:中国大陆
产品型号:
相关标签:ATCC细胞
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详细内容
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;2B10G10D10F7操作步骤
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 可产生单克隆抗体。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C25
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
小鼠杂交瘤细胞;2B10G10D10F7操作步骤操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
小鼠杂交瘤细胞;2B10G10D10F7操作步骤苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
小鼠杂交瘤细胞;2B10G10D10F7操作步骤培养温馨提示:
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CAS:36519-42-3公式:C42H44N4O5纯度:≥95%植物来源:蛇根亭碱用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。英文名称:Serpentinine
CAS:2239-24-9公式:C30H50O2纯度:≥95%植物来源:千层塔烯二醇,锯齿石松烯二醇,山芝烯二醇用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。英文名称:Serratenediol
CAS:117479-87-5公式:Cl7H24O12纯度:≥98%植物来源:胡麻属苷用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。英文名称:Sesamoside
CAS:77394-27-5公式:C23H26O8纯度:≥95%植物来源:蒿脂麻木质体用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。英文名称:Sesartemin
CAS:571-74-4公式:C16H12O7纯度:≥98%植物来源:3,4,5,7-四羟基-8- 甲氧基黄酮用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。英文名称:Sexangularetin
CAS:29836-27-9公式:C16H24O11纯度:≥98%植物来源:山栀苷甲酯用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。英文名称:Shanzhiside
CAS:138-59-0公式:C7H10O5纯度:≥98%植物来源:莽草酸用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。英文名称:Shikimic Acid
Q1643DL-甘油醛/ DL-2,3-二羟基丙醛/DL-丙醛糖/2,3-二羟基丙醛/丙醛糖/DL-GlyceraldehydeBR,90%56-82-6RT500毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,
1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,
中文名称: DL-甘油醛
其他中文名称: DL-2,3-二羟基丙醛;DL-丙醛糖;2,3-二羟基丙醛;丙醛糖
英文名称: DL-Glyceraldehyde
其他英文名称: DL-2,3-Dihydroxypropanal;DL-α,β-Dihydroxypropionaldehyde
产品规格: BR,90%
包 装: 500毫克/1克
CAS号:56-82-6
C3H6O3=90.08
小鼠杂交瘤细胞;2B10G10D10F7操作步骤级别:BR
含量:≥90.0%(GC)
性状:结晶。无味。对空气敏感。18℃时100ml水中能溶解3G,不溶于苯和戊烷。相对密度(d1818)1.455。熔点145℃
用途:生化研究。有机合成中间体
保存:RT