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大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞；BOS-5图片
点击次数：219发布时间：2017/11/30 15:43:00
更新日期：2021/11/4 11:55:12
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：ＡＴＣＣ细胞
优质供应
详细内容
细胞名称 大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞；BOS-5图片
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雌性大额牛与婆罗门牛杂交F1代的耳部皮肤组织，2010年由中科院昆明细胞库建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1：2传代；3-4天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR -
同工酶
染色体
使用权限 B类
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过*易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞；BOS-5图片 操作步骤：
大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞；BOS-5图片 操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
蛋白激酶Cα相互作用蛋白1抗体规格:?0.1ml英文名称：PICK1
磷酸相互作用结构域蛋白1抗体规格:?0.2ml英文名称：PID1
蛋白质磷酸酶2调节亚基1A抗体规格:?0.2ml英文名称：PPP2R1A
蛋白质磷酸酶2调节亚基1B抗体规格:?0.2ml英文名称：PPP2R1B
蛋白质磷酸酶2调节亚基3A抗体规格:?0.2ml英文名称：PPP2R3A
蛋白质磷酸酶1B抗体（PP2Cβ）规格:?0.2ml英文名称：PPM1B
蛋白质磷酸酶1G抗体（PP2Cγ）规格:?0.2ml英文名称：PPM1G
6磷酸果糖激酶1抗体规格:?0.2ml英文名称：PFK1
枯草溶菌素转化酶1抑制剂抗体规格:?0.2ml英文名称：PROSAAS
枯草溶菌素转化酶1抑制剂抗体规格:?0.2ml英文名称：PROSAAS
蛋白质磷酸酶2调节亚基5C/PP2A-B56-γ抗体规格:?0.2ml英文名称：PPP2R5C
蛋白质磷酸酶2调节亚基5D/PP2A-B56-δ抗体规格:?0.2ml英文名称：PPP2R5D
磷酸化丝氨酸/苏氨酸抗体规格:?0.1ml英文名称：Phosphoserine/threonine
粘度：87～95ml/g
K值：65～68
粘度：107～118ml/g
K值：71～72
粘度：127～135ml/g
性状：或浅黄色粉末。 低分子量的易溶于酮类、酯类和氯代烃类溶剂。高分子量的则难溶解。
用途：生化研究。用于轻工、建材、农业、日常生活、包装、电力等各领域
保存：RT
Q2028鞘磷脂/鞘磷酯/神经鞘磷脂/SphingomyelinBR，95%85187-10-6保存：-20℃5毫克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，
50毫克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，
中文名称： 鞘磷脂
其他中文名称： 鞘磷酯；神经鞘磷脂
英文名称： Sphingomyelin
其他英文名称： N-Acyl-4-sphingenyl-1-O-phosphorylcholine；N-Acyl-D-sphingosine-1-phosphocholine
产品规格： BR,95%
大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞；BOS-5图片包 装： 50毫克/250毫克
CAS号：85187-10-6
级别：BR
纯度：≥95%
性状：结晶性粉末。从牛脑或蛋黄提取。微吸湿。对光敏感。 溶于苯、、热乙醇，微溶于吡啶，几乎不溶于水。熔点 196～198℃。比旋光度＋6°～＋7°(/甲醇中)
用途：生化研究。
大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞；BOS-5图片培养温馨提示：
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