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非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS3；Vero-HCV-NS3图片
点击次数：108发布时间：2017/11/30 16:34:19
更新日期：2021/11/4 11:55:12
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：ＡＴＣＣ细胞
优质供应
详细内容
细胞名称 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS3；Vero-HCV-NS3图片
形态特性 上皮样细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 Vero-HCV-NS3细胞整合有丙型肝炎病毒的NS3基因，能稳定表达NS3蛋白，是HCV基础研究的极好摸型。它由武汉大学病毒学国家重点实验室郭佳博士于2008年构建并保存。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C10
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS3；Vero-HCV-NS3图片操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS3；Vero-HCV-NS3图片复苏操作要点：
1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过*易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS3；Vero-HCV-NS3图片培养温馨提示：
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3）从文献等处引用的信息本中心未进行核实，仅供参考。
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新型分泌细胞表面蛋白/成骨细胞相关蛋白SCUBE3抗体规格:?0.2ml英文名称：SCUBE3
内皮分泌蛋白SCUBE2抗体规格:?0.2ml英文名称：SCUBE2
亚硫酸盐氧化酶抗体规格:?0.2ml英文名称：Sulfite oxidase
生长抑素抗体规格:?0.1ml英文名称：Somatostatin
磷酸化突触融合蛋白1抗体规格:?0.1ml英文名称：phospho-Syntaxin 1a(Ser188)
固醇酰辅酶A脱氢酶1抗体规格:?0.1ml英文名称：SCD1
解旋酶SNF2L抗体规格:?0.2ml英文名称：SNF2L
山梨醇脱氢酶抗体规格:?0.1ml英文名称：Sorbitol Dehydrogenase
信号识别颗粒抗体规格:?0.1ml英文名称：Signal recognition particle
SH2结构域蛋白3A抗体规格:?0.2ml英文名称：SH2D3A
轴突导向因子SEMA6D抗体规格:?0.2ml英文名称：SEMA6D
弹性蛋白酶抑制剂抗体规格:?0.2ml英文名称：SKALP
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶39抗体规格:?0.2ml英文名称：STK39
磷酸化信号转导和转录激活因子5a抗体规格:?0.1ml英文名称：phospho-STAT5a(Tyr694)
磷酸化突触结合蛋白1抗体规格:?0.1ml英文名称：phospho-SYT1(Thr202)
磷酸化信号转导和转录激活因子5a抗体规格:?0.1ml英文名称：phospho-STAT5a(Ser726)
磷酸化信号转导和转录激活因子5a抗体规格:?0.1ml英文名称：phospho-STAT5a(Ser780)
磷酸化突触蛋白6抗体规格:?0.1ml英文名称：phospho-SYT6 (Thr418)
0004结晶紫/龙胆紫/甲基青莲/甲基紫10B/六甲基紫/盐基紫3/甲紫/甲基紫/碱性紫3/碱性紫5BN/盐基品紫/甲基紫5GN/碱性紫6BN/碱性艳紫3B/盐基青莲/盐基结晶紫/碱性青莲/303盐基青莲粉2B/盐基青莲粒2B/氯化六甲基对品红碱/Crystal violet国产548-62-9AR25克RT
国产1公斤
国产高纯25克
国产100克
国产AR50毫升
国产250毫升
中文名称： 结晶紫
其他中文名称： 甲基青莲；甲基紫10B；六甲基紫；盐基紫3；甲紫；甲基紫；龙胆紫；碱性紫3；碱性紫5BN；盐基品紫；甲基紫5GN；碱性紫6BN；碱性艳紫3B；盐基青莲；盐基结晶紫；碱性青莲；303盐基青莲粉2B；盐基青莲粒2B；氯化六甲基对品红碱
英文名称： Crystal violet
其他英文名称： Basic Violet 3；Methyl violet；C.I. 42555；Gentian Violet；Hexamethylpararosaniline chloride；Methyl Violet 10B
产品规格： AR
包装：25克/100克
产品规格： AR
包装：100毫升/500毫升
产品规格： 高纯
包装：25克/100克
CAS号：548-62-9
C25H30ClN3=407.98
级别：AR
吸光试验Absorbance test：1.08～1.15
紫外吸收度：1900～2000
灵敏度试验Sensitivity as indicator test：合格
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS3；Vero-HCV-NS3图片乙醇不溶物Insoluble matter in ethanol：≤0.1%
灼烧残渣：≤2.0%
干燥失重：≤6.0%
吸收波长：588～592nm
级别：High Purity Grade
Em (590nm, Water)：>93500
干燥失重：≤7.5%
